高分辨原位拉曼光譜儀的別名又稱為分光儀,比較廣泛的認知為直讀光譜儀。光譜儀簡單來說就是用來分解成分比較復(fù)雜的光譜線的一個儀器,它的組成部分就是有棱鏡或衍射光柵等構(gòu)成的,然后利用光譜儀可以測量需要被測量的物體表面反射的光線。
高分辨原位拉曼光譜儀外形構(gòu)造比較簡單,設(shè)計更加靈活,操作也很簡便,還可以手持使用,也可以通過集成的小瓶取樣模式使用,還可以固定在機器人手臂上遠程遙控使用。特別是測量的速度又快又準確,以地波數(shù)的測量能力著稱。
像我們平時所見的陽光是可以用肉眼可以看見的七色光,那么這些陽光再利用光譜儀進行分解,按照波長來排列,這些可見光只占了光譜中非常小的一個區(qū)域,所以像那些紅外線、微波、紫外線、X射線等等光線都是我們?nèi)庋鬯床灰姷墓狻?/div>
拉曼散射的產(chǎn)生需要光進行激發(fā)。由于拉曼散射的光強較弱,所以拉曼光譜儀的理想激光光源要具有良好單色性,高強度和良好的偏振性。
目前,大多數(shù)的拉曼光譜儀使用波長為532nm和785nm的激光源,另外還有633nm,1064nm等波長。拉曼位移與選用的激光源波長是多少nm無關(guān)。雖然同一樣品用不同激光照射所產(chǎn)生的頻移相同,但仍需要對激光光源的波長進行選擇。
激光光源的波長越小,拉曼散射光強越大,但拉曼信號也越容易被熒光遮蔽。對于生物樣本,如果采用532nm的激光,拉曼信號會被熒光背景遮蔽,這種情況下,使用633nm或785nm的激發(fā)波長可以有效地降低熒光背景。
使用波長較長的激光源時如1064nm,拉曼散射光強低,為了讓拉曼散射光容易觀察,就需要增加激光源的功率,或者提高曝光時間。對于生物樣本,用波長較長的激光源顯然具有更好的效果,但也需要主要光強的問題。
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