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移液器校準(zhǔn)的方法和校準(zhǔn)程序

來源:上海鹿森生物工程有限公司   2022年11月24日 09:02  

移液器的校準(zhǔn),意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。移液器校準(zhǔn)是指通過校對調(diào)整移液器,使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準(zhǔn)期間,可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的 10%(以較高者為準(zhǔn))檢查性能。當(dāng)您購買移液器時,您應(yīng)該選擇一款能夠針對不同溫度和各種粘性液體進行重新校準(zhǔn)和調(diào)整的移液器。

在質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器

質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準(zhǔn)的主要目標(biāo)是確保以預(yù)期的精度進行測量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格,而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準(zhǔn)實質(zhì)是根據(jù)*標(biāo)準(zhǔn)(DIN 12650 或 ISO 8655)設(shè)置限制。根據(jù)質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器的程序如下:

一、設(shè)備要求和測試條件

1.平衡度測定:

天平的刻度值應(yīng)根據(jù)所選的移液器體積來選擇。

注意:使用已知砝碼定期檢查您的天平校準(zhǔn)情況。

2.測試液體要求:

蒸餾水或去離子水,“3 級”,符合 ISO 3696。測試水在校準(zhǔn)前至少在校準(zhǔn)室中放置 2 小時,以達(dá)到與測試室條件的平衡。測試室條件要求:

3.測試在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 溫度下在無氣流的房間中進行。建議相對濕度在 45% 以上。尤其是體積在 50 vl 以下的情況下,空氣濕度應(yīng)盡可能高,以減少蒸發(fā)損失的影響。

- 測試室內(nèi)的移液器、水和空氣應(yīng)處于相同溫度。

- 新吸頭應(yīng)預(yù)先潤濕 1 至 3 次以提高準(zhǔn)確性。

- 始終從水箱中吸取水,不要從天平中取回水。

- 根據(jù)使用頻率和應(yīng)用情況定期檢查校準(zhǔn),但至少每年一次。如果每天使用,建議間隔三個月。

二、一般移液器校準(zhǔn)程序

1.收到需要校準(zhǔn)的移液器后,每個移液器都小心地打開包裝并檢查是否有任何可見的損壞跡象。發(fā)現(xiàn)的任何可見損壞都會立即報告給客戶??蛻魧⒈桓嬷獡p壞是否可以修復(fù)以及將收取哪些額外費用??蛻魧l(fā)出新的工作訂單以支付維修費用。

2.對每個移液器進行輻射污染掃描。發(fā)現(xiàn)的任何輻射污染都會立即報告給客戶,并且移液器將被拒絕校準(zhǔn)。

3.所有客戶的移液器都經(jīng)過計數(shù),并與提供的工作訂單上報告的數(shù)量進行比較。任何數(shù)量差異都會立即報告給客戶??蛻魧⒂袡C會找到任何缺失的數(shù)量,否則工作訂單將需要修改并由客戶簽署。

4.每個工作訂單將被放置在一個單獨的內(nèi)部存儲箱中,直到計劃進行校準(zhǔn)。

為每個工作訂單分配單獨的工作 ID 號。

6.檢查客戶信息與存檔信息的任何差異,并在需要時進行更正。所有移液器都在分配的作業(yè) ID 號下輸入 Cal Lab 數(shù)據(jù)庫,并為每個儀器分配 ID 號。

三、預(yù)校準(zhǔn)程序

· 在校準(zhǔn)和任何移液器調(diào)整之前獲得和記錄的數(shù)據(jù)也將被記錄下來。

· 

· 每個移液器都將在制造商指/定的MIN和MAX量程點進行測試。每個點進行十次測試。

· 作為預(yù)防性維護的一部分,每個移液器都根據(jù)制造商的圖表進行拆卸,并用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)溶液徹/底清潔。

· 所有零件都經(jīng)過仔細(xì)檢查,活塞在大多數(shù)情況下都經(jīng)過拋光,活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更換。完成后,將根據(jù)制造商的圖表和程序重新組裝每個移液器。再次目視檢查移液器的功能是否正常。

四、移液器校準(zhǔn)步驟
1.在移液器校準(zhǔn)開始時,每個移液器在進行任何調(diào)整之前都會預(yù)先檢查 3 次。如果移液器失敗,將執(zhí)行適當(dāng)?shù)男?zhǔn)調(diào)整。校正后,每臺儀器將在最/低和最高量程點進行校準(zhǔn),每個測試點進行10次測試。

2.校準(zhǔn)數(shù)據(jù)將被記錄并報告在校準(zhǔn)報告中。

3.為每個移液器發(fā)布校準(zhǔn)報告以及整個工作的校準(zhǔn)摘要。適當(dāng)?shù)募夹g(shù)人員簽署報告。

創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)簽并貼在每個移液器上。所有移液器都經(jīng)過交叉核對客戶提供的文書工作以及實驗室內(nèi)創(chuàng)建的文檔。

4.QC主管檢查隨機選擇的移液器的整體性能。

5.如果檢測到任何錯誤,則將整個送回以進行重新檢查。

6.QC主管批準(zhǔn)工作,移液器經(jīng)過仔細(xì)包裝并隨附所有校準(zhǔn)文檔交付給客戶。

移液器誤差的來源:

l 揮發(fā)性液體蒸發(fā)。在飽和空氣中使用。

l 高密度液體下沉。改變技術(shù)。

l 粘性液體會粘在尖/端。改變技術(shù)。

l 親水吸頭將保留液體。預(yù)濕筆尖。

l 浸入式吸頭攜帶液體。浸入 2-3 毫米。

l 有角度的移液器會吸收更多的液體。保持垂直。

l 表面張力會降低精度。改變技術(shù)。

l 冷熱液體。在室溫下吸取液體。

l 人的因素。練習(xí)和觀察技術(shù)。

五、移液器校準(zhǔn)計算公式:

質(zhì)量到體積的轉(zhuǎn)換

V = (w + e) x Z

V = 體積 (vl)

w = 重量(毫克)

e = 蒸發(fā)損失 (mg)

Z = mg/vl 轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換系數(shù)

注意:蒸發(fā)損失可能在體積小時明顯。要確定質(zhì)量損失,請將水分配到稱量容器中,記下讀數(shù)并開始用秒表計時。檢查讀數(shù)在5秒內(nèi)下降了多少。將此與移液時間進行比較。通常移液時間可能為5秒,質(zhì)量損失高達(dá)2 mg。如果在容器上使用蒸發(fā)阱或蓋子,則無需進行蒸發(fā)校正。

換算系數(shù)Z用于計算在測試溫度和壓力下懸浮在空氣中的水的密度。

準(zhǔn)確度是移液器的分配體積和選定體積之間的差異。

精度在移液器校準(zhǔn)證書上以相對值表示:

精密度(隨機誤差)
精密度是指移液的可重復(fù)性。它表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差 (s) 或變異系數(shù) (cv)。除了移液器的特性外,實驗室實踐和用戶體驗是影響精度的主要因素。

根據(jù) DIN 12650的誤差(F值)

DIN標(biāo)準(zhǔn)沒有給出準(zhǔn)確度和精密度的單獨限制,而是使用組合誤差限制:F 值。

F=|一個|+2xs

計算相對 F 值:

F% =|%|+ 2x數(shù)量

 2 顯示了根據(jù) DIN 12650 標(biāo)準(zhǔn)對單通道空氣置換移液器的誤差限制。對于多道移液器,這些限制加倍。對于可變?nèi)萘恳埔浩?,?biāo)稱容量是最大容量。標(biāo)稱體積的絕對 vl 限制適用于整個體積范圍內(nèi)的每個選定體積。

例如,對于 20-200UL的移液槍,每個選定體積的誤差限制為2.0ul。如果移液器的標(biāo)稱體積介于表中的數(shù)值之間,則使用最/接/近體積的相對誤差限值 F%。如果標(biāo)稱體積正好在表 2 中的兩個體積之間,則使用較低體積的相對誤差限值 F%。

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