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DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*組成部分，是參與DNA復(fù)制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里，從早期被發(fā)現(xiàn)的Taq DNA聚合酶到現(xiàn)在，酶越來(lái)越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對(duì)舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場(chǎng)需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。
一、什么是什么是高保真酶
高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性，可沿5'→3'方向催化合成DNA；酶切中心具有3'→5'外切酶活性，可以進(jìn)行堿基錯(cuò)配的修復(fù)。常見(jiàn)的高保真DNA聚合酶類型有Pfu、KOD等。
二、如何選擇高保真酶
對(duì)于測(cè)序、基因功能研究、蛋白表達(dá)、定點(diǎn)突變等，高保真性的擴(kuò)增是非常重要的，可以確保各種擴(kuò)增子的可靠擴(kuò)增。以測(cè)序文庫(kù)擴(kuò)增過(guò)程為例，測(cè)序過(guò)程中的突變會(huì)給序列拼接造成困難，甚至?xí)蓴_某些需要低頻檢測(cè)的分析結(jié)果。對(duì)于市場(chǎng)上琳瑯滿目的各種高保真DNA聚合酶，選擇一款合適的酶產(chǎn)品是極為必要的。市面上常見(jiàn)的高保真酶特性主要包含保真度、擴(kuò)增速率、特異性、是否耐U等。
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