植物類黃酮檢測(cè)試劑盒（微板法）

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1784

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

類黃酮(Flavonoids)是植物重要的一類次生代謝產(chǎn)物，它以結(jié)合態(tài)（黃酮苷）或自由態(tài)（黃酮苷元）形式存在于水果、蔬菜、豆類和茶葉等許多食源性植物中。槲皮素(Quercetin)是最典型的類黃酮，其在C3位羥基上結(jié)合糖分子即形成植物中普遍的成分—蕓香苷(Flavonoids)。柑橘屬的多種水果均含有大量的黃酮化合物，如橘紅素(Tangeretin)和川陳皮素(Nobiletin)，大豆中含有一種異黃酮化合物—大豆異黃酮，茶葉中的茶多酚是由沒食子酸和類黃酮—兒茶酚組成。

植物類黃酮檢測(cè)試劑盒(微板法)檢測(cè)原理是類黃酮溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提類黃酮，根據(jù)提取液的吸收光譜特性，可利用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)325nm處測(cè)定其吸光度，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較計(jì)算出類黃酮含量，主要用于植物組織或果實(shí)中類黃酮的提取以及定量檢測(cè)類黃酮含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 實(shí)驗(yàn)材料：桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織

2. 研缽或勻漿器

3. 離心管、離心機(jī)

4. 濾紙或紗布

5. 酶標(biāo)儀、96 孔板

操作步驟（僅供參考）：

1. 類黃酮提取：

①取果實(shí)或其他植物組織，洗凈，擦干，稱取剪碎的新鮮樣品0.25g，置于4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器中。

②加入4℃預(yù)冷的2~3ml Flavonoids Assay buffer，充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管，用Flavonoids Assay buffer沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管，補(bǔ)加Flavonoids Assay buffer至8ml。4℃避光靜置20min，期間搖動(dòng)2~3次，然后過濾至離心管，也可用離心機(jī)8000r/min離心3min，濾液（上清液）即為類黃酮粗提液。

2. 稀釋Flavonoids標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適量的Flavonoids標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，用Flavonoids Assay buffer稀釋至100ug/ ml，再按下表進(jìn)行梯度稀釋：

3. Flavonoids加樣：取96孔板，按照下表設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻。如果樣品中的類黃酮濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管，求平均值。

4. Flavonoids測(cè)定：以空白調(diào)零，以酶標(biāo)儀測(cè)定系列標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔在 325nm 處吸光度。

計(jì)算：

以1~6號(hào)孔系列類黃酮標(biāo)準(zhǔn)濃度(2.5、5、10、15、20、25 ug /ml)為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而計(jì)算出各測(cè)定管類黃酮含量(ug /ml)。

組織樣品的類黃酮(ug /g)= C×V _T×N/W

液體樣品的類黃酮(ug/ml)=C×N×1/V₁

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定孔 Flavonoids 含量(ug /ml)

V_T =類黃酮粗提液總體積(ml)=8

V₁ =加樣時(shí)所用類黃酮粗提液的體積(ml)=0.3

W=樣品鮮重(g)

N=稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng)：

1. 為了避免類黃酮見光分解，操作時(shí)應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間。

2. 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)類黃酮含量適當(dāng)調(diào)整。

3. Flavonoids Assay buffer應(yīng)密閉保存，避免有效成分揮發(fā)。

4. 本產(chǎn)品的線性范圍是1~120ug/ml，樣品濃度在5~25ug /ml為宜，超過100ug /ml建議用Flavonoids Assay buffer 稀釋。

5. 如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件： 12個(gè)月有效。4℃運(yùn)輸，4℃保存。