大鼠小腸粘膜上皮細胞操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

Saos-2，人成骨肉瘤細胞

Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細胞

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞

MGC80-3（MGC-803）人胃癌細胞

EC109，人食管癌細胞

HGC-27人胃癌細胞

AGS人胃腺癌細胞

U251人膠質(zhì)瘤細胞

THP-1人單核白血病細胞

HuH-7人肝癌細胞

RBE, 人肝膽管癌細胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

QGY-7701, 人肝癌細胞

PANC-1, 人胰腺癌細胞

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

Hep G2, 人肝癌細胞系

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

QBC-939, 人膽管癌細胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞

A549, 人肺癌細胞系

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株