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總膽固醇(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)

來源:上海尚寶生物科技有限公司   2022年05月31日 11:16  

總膽固醇(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)

產(chǎn)品貨號: BA1761

 

產(chǎn)品規(guī)格:60T

 

產(chǎn)品簡介

膽固醇(Cholesterol)又稱膽甾醇,是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物,分子式C27H46O。膽固醇廣泛存在于動物體內(nèi),其中腦、神經(jīng)組織,在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也較高??偰懝檀?span style="font-family:Times New Roman">(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)檢測原理是膽固醇及其脂,在強酸存在下與鄰苯二甲醛反應(yīng),產(chǎn)生紫紅色化合物,該化合物在550nm波長處有最大吸收峰,分光光度計在550nm處進行比色測定,膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。本試劑盒用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測定。

 

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

60T

保存條件

試劑(A):膽固醇標準(1mg/ml

1ml

4 避光

試劑(B):TC assay buffer

100ml

室溫

試劑(C):鄰苯二甲醛粉劑

2×10mg

4 避光

試劑(D):鄰苯二甲醛稀釋液

30ml

室溫

 

操作步驟(僅供參考)

1. 樣本處理:

①血清、血漿、腦脊液樣本:從待測樣本中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測。

②細胞樣本:

a、取適量的細胞(一般推薦>106以上),離心,棄上清,留取沉淀。

b、PBS或生理鹽水清洗1~2次,離心,棄上清,留取沉淀。

c、加入PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,功率300W,每次3~5s,間隔30s,重復3~5次。

③組織樣本:準確稱取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):生理鹽水=的比例,加入生理鹽水,冰浴條件下手動或機械勻漿。離心,取上清待用。

2. 配制膽固醇標準工作液:按膽固醇標準(1mg/ml)TC assay buffer的比例準確混合,即為膽固醇標準工作液(0.1mg/ml),然后按下表依次稀釋膽固醇標準工作液。

加入試劑(ml/管號

0

1

2

3

4

膽固醇標準工作液(0.1mg/ml

0

0.06

0.12

0.18

0.24

TC assay bufer

0.24

0.18

0.12

0.06

0

總膽固醇濃度(mg/ml

0

1

2

3

4

3. 配制鄰苯二甲醛工作液:取1(10mg)鄰苯二甲醛粉劑的準確加入鄰苯二甲醛稀釋液1,充分混勻,即為鄰苯二甲醛工作液。4℃避光保存,2周有效。?

4. 配制強酸工作液:取適量的TC?assay?buffer和濃硫酸等量混合,即為強酸工作液。注意:本試劑盒不提供濃硫酸,需用戶自備。二者混合時,一定小心操作,以免誤傷自己。配制好的強酸工作液工作液中的硫酸含量應(yīng)準確,否則有可能影響顯色效果。?

5. 分光光度計膽固醇測定操作:?

①按下表依次加入試劑:

加入試劑(ml

空白管

標準管

待測管

蒸餾水

0.006



系列膽固醇標準工作液


0.006


待測血清或其他樣本



0.006

TC assay buffer

024

0.24

0.24

鄰苯二甲醛工作液

0.12

0.12

0.12

強酸工作液

2.4

2.4

2.4

②充分混勻,?靜置。?

③以分光光度計,1cm比色杯測定550m吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標準管和各待測管的吸光度。?

?

計算:?以吸光度為縱坐標,以膽固醇濃度為橫坐標,作標準曲線。對照標準曲線即知待測樣本的濃度。

 

注意事項:

1. 上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。?

2. 本法可直接用于檢測腦脊液中的TC含量,也可直接檢測尿液中的TC含量。?

3. 待測樣本如不能及時測定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。?

4. 如果樣本TC濃度過高,結(jié)果可能呈假性降低,應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

 

有效期:6個月有效。


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