文氏巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒反應五要素：

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

核突觸蛋白α抗體

自噬相關(guān)蛋白4B抗體

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體

α-輔肌動蛋白4(內(nèi)參)抗體

堿性磷酸酶抗體

AU1 tag標簽抗體

脂肪細胞增強結(jié)合蛋白1

蛋白激酶B

蛋白激酶B

血管生成素樣蛋白2抗體

血管生成素3/血管生成素4抗體

膜粘連蛋白 I抗體

膜粘連蛋白 Ⅱ抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體

水通道蛋白4抗體

活化復制因子2抗體

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體

血管緊張素Ⅱ抗體

血管緊張素Ⅱ受體1抗體

血管生成素-1抗體

膜粘連蛋白5抗體

重組膜粘連蛋白5抗體

銜接蛋白α-Adaptin抗體

凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）