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對(duì)于多肽的一些常用的使用知識(shí)看完便知
對(duì)于多肽的一些常用的使用知識(shí)，對(duì)此類信息感興趣的可千萬(wàn)不要錯(cuò)過(guò)了，話不多說(shuō)下面讓我們一起來(lái)了解一下吧。
1、保存
大多數(shù)多肽在-20℃很穩(wěn)定，特別是冷凍干燥并保存在干燥器中，在將它們暴露于空氣之前，冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少，當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí)，方法是以小的工作樣量存放。
對(duì)于含Cys,MetorTrP的多肽，脫氧緩沖劑對(duì)其溶解不可少，因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化，在封瓶前，慢慢流過(guò)多肽的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解，所有這些肽與不含這些有問(wèn)題解苷的那些肽相比，生命期有限。
2、溶解性
大多肽的道選溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對(duì)于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽，需要DMF、脲、guanidiniamchloride或acetonitnle來(lái)溶解，這些溶劑可能某些實(shí)驗(yàn)有副作用。所以我們建議設(shè)計(jì)多肽時(shí)要加注意。
殘基Ala,Cys,Ile,Leu,Met,Phe和Val將全增加多肽的溶解難度。
3、保存操作
包裝1mg或更少的多肽按凈重包裝，聲明的小瓶重不含相關(guān)抗離子和水。例如，氨基酸分析決定的肽含量是80%，在1mg樣品中，那么瓶中毛重是1.25mg。
大量的多肽以毛重算。標(biāo)出的重量含相關(guān)抗離子和水，例如，25mg樣品中肽百分比為90%，那么，實(shí)際肽量為25mg×90%=22.5mg
不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%，而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)(如Arg,Lys)的抗離子量和肽新水性決定。這是合成肽的本身特性。
4、凍干肽的保存
所有產(chǎn)品應(yīng)存于冰箱，最好為-20℃。多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變。
5、肽溶液的保存
溶液肽遠(yuǎn)比凍干形式不穩(wěn)定，溶液應(yīng)為中性pH(pH5-7),-20℃保存的，為避免樣品的反復(fù)凍融，最好分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完，應(yīng)扔掉，細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩，為克服此，肽應(yīng)溶于無(wú)菌水，或肽溶液用0.2μM濾膜過(guò)濾。
6、多肽的重建和操作
多數(shù)肽溶于無(wú)菌蒸溜水。初次溶解時(shí)，要注意使初始濃度比要求濃度大，如果多肽僅有限溶解性，這便允許加入其它溶解劑或緩沖鹽。
如果多肽在水中的溶解性有限，有幾種選擇可幫助溶解：
對(duì)堿性肽用稀乙酸(含Arg,Lys,His)
酸性肽用稀氨水(含Asp,Glu)
對(duì)極疏水的肽用10%有機(jī)修飾物(Acetonitnile,Methanol)
極不溶的肽用DM50或DMF
guaniclinehydrochloride或脲的濃溶液也很有用，與上述方法合用，聲處理也是溶解多肽的有效手段。
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