PriCells: 原代細(xì)胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法
PriCells: 原代細(xì)胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法
原理:
蘇dan紅染料在脂類物質(zhì)中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,如果染料與含有脂類的試樣接觸,便有大量染料進(jìn)入脂類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)內(nèi),使這些結(jié)構(gòu)呈紅色。多用蘇dan紅染料、油紅O、尼羅藍(lán)等溶于脂類的染料染色,使脂質(zhì)呈色。也可用四氧hua鋨染色,脂肪酸或膽堿可使四氧hua鋨還原為二氧化鋨而呈黑色。
配制試劑:
1.蘇dan紅Ⅲ染色液:將1g蘇dan紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用;
2.甲醛鈣固定液:將10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
3.甘油明膠:將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其*溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混勻后即得。于4℃儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?/div>
染色步驟:
1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次;
2.用甲醛鈣固定液固定20min;
3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次;
4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次;
5.用蘇dan紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品,染色10—30min;
6.用70%乙醇漂洗蓋片3次;
7.用甘油明膠封片后觀察;
結(jié)果:
原代細(xì)胞含脂類的區(qū)域呈橘紅色;
PriCells提供:
1.各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
2.各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑;
3.原代細(xì)胞分離試劑盒;
4.原代細(xì)胞鑒定試劑盒;
5.原代細(xì)胞總蛋白質(zhì)抽提物;
6.原代細(xì)胞總RNA;
7.原代細(xì)胞總DNA;
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