PriCells: 正常晶狀體上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)

來源：武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司 2021年10月13日 10:40

PriCells: 正常晶狀體上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)材料：

1. 材料來源：人眼、兔眼或者豬眼等；

2. 清洗液：不含Ca²⁺和Mg²⁺的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；

3. 器械：無齒顯微小鑷子2把、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿若干；

4. 培養(yǎng)液：為含15%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液；

實(shí)驗(yàn)方法：

1. 取材

1）摘取動(dòng)物或人的供體眼球，作常規(guī)消毒處理；

2）用刀片沿角鞏膜緣環(huán)形剪開眼球，除去角膜和虹膜，并用角膜剪刀剪斷晶狀體懸韌帶，取出晶狀體，置于培養(yǎng)皿中；

3）用PBS液洗去黏附在晶狀體表面的虹膜色素及玻璃體。棄去洗液；、

4）將晶狀體的凸面向下，用4號(hào)針頭于晶狀體赤道部稍靠后的部位環(huán)刺一圈，然后用兩把無齒顯微鑷子輕輕分離出晶狀體前囊膜；

2. 原代培養(yǎng)；

1）取下晶狀體前囊膜后，一般不經(jīng)洗滌。將其剪成余額1.5mm×1.5mm的植塊；

2）用無齒顯微鑷子挑起植塊，平貼于培養(yǎng)板中；

3）置于37℃恒溫箱中約5min，待組織塊稍干后便可加入培養(yǎng)液；

4）按常規(guī)方法培養(yǎng)。每周換培養(yǎng)液2次，每次更換2/3的培養(yǎng)液量；

3. 傳代培養(yǎng)：在培養(yǎng)細(xì)胞基本融合形成單層時(shí)即需傳代。否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過大而致營(yíng)養(yǎng)不足。按常規(guī)方法進(jìn)行傳代培養(yǎng)；

PriCells提供：

1. 各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；

2. 各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑；

3. 原代細(xì)胞分離試劑盒；

4. 原代細(xì)胞鑒定試劑盒；

5. 原代細(xì)胞總蛋白質(zhì)抽提物；

6. 原代細(xì)胞總RNA；

7. 原代細(xì)胞總DNA；

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