Gemini100-512人AB血清

把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是：良好的細(xì)胞來(lái)源，正確的實(shí)驗(yàn)操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”，而胎牛血清就好比于這個(gè)家的裝修，可以提高細(xì)胞的居住環(huán)境和舒適性，讓細(xì)胞更好更快地生長(zhǎng)

當(dāng)然，胎牛血清并不是完美的，它除了可為細(xì)胞提供生長(zhǎng)所必須的蛋白、細(xì)胞因子、激素和微量元素等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)也含有內(nèi)毒素、補(bǔ)體、抗體等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有危害的成分，若選擇不當(dāng)，不合適的FBS會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，F(xiàn)BS既是讓細(xì)胞快樂(lè)成長(zhǎng)的*營(yíng)養(yǎng)物，又是可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“定時(shí)の炸的啊彈”！辛苦養(yǎng)起來(lái)的細(xì)胞可能因?yàn)镕BS用錯(cuò)而一切歸零……

近年來(lái)無(wú)血清培養(yǎng)基和非動(dòng)物來(lái)源的培養(yǎng)基越來(lái)越受到關(guān)注，但目前大部分細(xì)胞還無(wú)法適用這些培養(yǎng)基，并且存在費(fèi)用較高和細(xì)胞生長(zhǎng)較緩慢的缺點(diǎn)，因此，含有FBS的*培養(yǎng)基仍然是目前主流的細(xì)胞培養(yǎng)體系。 

那么，應(yīng)如何為你的細(xì)胞選購(gòu)FBS呢？選購(gòu)FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)？

 1.產(chǎn)品檢測(cè)

每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè)。

質(zhì)控環(huán)節(jié)*，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)包括內(nèi)毒素、總蛋白、細(xì)菌、病毒等，例如我國(guó)藥典規(guī)定，F(xiàn)BS中內(nèi)毒素含量應(yīng)≤10EU/mL，另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測(cè)不高于30mg/dL。

 2. 可追溯性

目前市面上存在較多以假亂真的FBS產(chǎn)品，科研工作者對(duì)血清的真實(shí)產(chǎn)地、來(lái)源難以鑒別。

血清行業(yè)協(xié)會(huì)（ISIA）實(shí)施了供應(yīng)鏈可追溯性的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，以確保FBS的質(zhì)量和安全性。

例如，F(xiàn)BS供應(yīng)商是否保留原產(chǎn)地的可追溯記錄？是否持有血清生產(chǎn)各階段處理、運(yùn)輸和商業(yè)交易的文件？這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。

 3. 生長(zhǎng)驗(yàn)證

我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實(shí)、健康地生長(zhǎng)。在確保了FBS的來(lái)源真實(shí)性、安全可靠性后，下一步就要對(duì)FBS的質(zhì)量，即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了，而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，質(zhì)量粗糙的FBS可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻。經(jīng)過(guò)質(zhì)量驗(yàn)證的FBS，則可以十分確定這款FBS對(duì)哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果，進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對(duì)于質(zhì)量?jī)?yōu)質(zhì)的FBS，通常采用血清敏感性細(xì)胞（如干細(xì)胞）來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)驗(yàn)證，若培養(yǎng)效果良好，則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。

 4. 穩(wěn)定性

FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品，其生產(chǎn)在本質(zhì)上會(huì)受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟(jì)條件和牛群規(guī)模及疫情等各種因素的影響，導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價(jià)格及批次間的不穩(wěn)定性，從而造成實(shí)驗(yàn)的不順甚至實(shí)驗(yàn)失敗。在過(guò)去，國(guó)內(nèi)外已有多個(gè)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)過(guò)因血清批間差異大而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)法重復(fù)的情況，浪費(fèi)了巨大的時(shí)間和金錢成本。

因此，找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應(yīng)商，對(duì)于確保自己細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和可重復(fù)性具有重要意義，而且花在重復(fù)實(shí)驗(yàn)或檢驗(yàn)新批次上的時(shí)間將大大減少。

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實(shí)驗(yàn)室操作中要注意及處理方法：

1. 血清保存: 建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2. 解凍血清的方法: 建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。

5. Gemini血清有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái)，不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量!

6. 為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?
胎牛血清沒有預(yù)老化，儲(chǔ)存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲(chǔ)存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。
7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

解凍Gemini血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多