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液相色譜儀工作原理及選購(gòu)方法

來(lái)源:杭州瑞析科技有限公司   2019年07月04日 16:21  

近幾年隨著液相色譜儀的熱銷(xiāo),這也導(dǎo)致了很多元原本沒(méi)有了解過(guò)它的客戶(hù),都想要了解一下這款熱銷(xiāo)產(chǎn)品,因此如果你有興趣的話(huà)可以一起來(lái)跟我們來(lái)了解一下液相色譜儀的工作原理及選購(gòu)方法。

   液相色譜儀工作原理:

   儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定  相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。

主要用于對(duì)高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過(guò)色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門(mén)。

 


液相客戶(hù)問(wèn)圖如果解決

液相色譜儀選購(gòu)方法

液相色譜儀已經(jīng)遍布各大高校,研究所,醫(yī)院,生化企業(yè)實(shí)驗(yàn)室等等。而市場(chǎng)上的液相色譜儀是五花八門(mén),每個(gè)儀器的不同部件的性能又是多鐘多樣,相對(duì)于時(shí)間緊缺的實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),也沒(méi)有很多精力去逐個(gè)挑選甄別。因此在此對(duì)液相色譜儀做個(gè)簡(jiǎn)單分析。
 

液相色譜儀由包括輸液系統(tǒng),進(jìn)樣系統(tǒng),分離系統(tǒng),檢測(cè)系統(tǒng),數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),輸助設(shè)備(色譜柱恒溫箱等)幾大部分組成的。但是在機(jī)器工作的同時(shí)還需要樣本處理設(shè)備的支持。只有各個(gè)部分都能協(xié)調(diào)的運(yùn)作才能發(fā)揮出機(jī)器的*的性能。因此我們?cè)谶x擇儀器的時(shí)候需要充分考慮到儀器的方方面面才能拿到自己滿(mǎn)意的機(jī)器。
 

首先從液相色譜儀常規(guī)的幾個(gè)部件做個(gè)簡(jiǎn)單的分析。
 

(一)輸液泵應(yīng)具備如下性能:
 

① RSD(流量穩(wěn)定性)<0.3%;
 

② 流量范圍寬, 0.1~5.0ml/min內(nèi)連續(xù)可調(diào),有的實(shí)驗(yàn)則需要更大流量;
 

③ 輸出壓一般應(yīng)能達(dá)到150~400 kg/cm2,流量越大,zui高壓力越低;
 

④ 液缸容積小,有助于減少流動(dòng)相死體積,利于清洗。
 

⑤ 密封性能好,耐腐蝕。
 

(二)檢測(cè)器
 

①紫外檢測(cè)器,分為可變單波長(zhǎng)檢測(cè)器VWD和二極管陣列檢測(cè)器DAD,可以檢測(cè)有紫外吸收的物質(zhì)
 

②熒光檢測(cè)器,檢測(cè)有熒光的物質(zhì)
 

③視差折光檢測(cè)器,通用型檢測(cè)器,但對(duì)環(huán)境要求極為苛刻,而且靈敏度低
 

④ELSD,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
 

⑤MSD,質(zhì)譜檢測(cè)器
 

常用的是紫外檢測(cè),然后是MSD和ELSD
 

(三)色譜柱
 

要求柱效高、選擇性好,分析速度快等。目前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、氧化鋁、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米。
 

一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;同系物分析500即可;難分離物則可用2萬(wàn)的柱子。
 

因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)基本能滿(mǎn)足復(fù)雜混合物分析的需要。所以要根據(jù)自己實(shí)際情況來(lái)選擇合適的柱子。
 

柱效受柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達(dá)到*效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
 

此外,溫度在色譜分析中是個(gè)不容忽視的環(huán)境條件,環(huán)境溫度對(duì)溶劑的溶解能力、色譜柱的性能、流動(dòng)相的粘度都有影響。而且不同的檢測(cè)器對(duì)溫度的敏感度不一樣。保持恒定的溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)而言是個(gè)不容忽視的條件,因此也要留意注溫箱的選擇。以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 

(四)進(jìn)樣器
 

進(jìn)樣裝置要求:密封性好,重復(fù)性好,死體積小,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。而且進(jìn)樣方式多種多樣,可分為隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣。自動(dòng)進(jìn)樣器則是市場(chǎng)發(fā)展的趨勢(shì)。
 

(五)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)
 

一般專(zhuān)業(yè)的液相色譜儀生產(chǎn)廠家都有自己配套的液相色譜儀控制軟件。但有不少液相色譜儀可以使用通用型的色譜數(shù)據(jù)工作站進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算處理。進(jìn)口軟件價(jià)格比較高,這個(gè)自己得根據(jù)資金選擇了。
 

二元泵和四元泵的區(qū)別二元有兩個(gè)泵,泵后混合,氣體的溶解度隨壓力的增大而增大,所以二元高壓混合不會(huì)產(chǎn)生氣泡。四元只一個(gè)泵(另外一個(gè)是輔泵),是泵前混合,在常壓下進(jìn)行的,兩種液體混合時(shí),會(huì)降低氣體在混合溶液中的溶解度,通常會(huì)有氣泡產(chǎn)生,所以四元低壓梯度系統(tǒng)一定要配

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