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單克隆分離深受廣大客戶的好評(píng)

來(lái)源:Bio-Techne   2019年05月05日 16:33  
    單克隆分離深受廣大客戶的好評(píng)  
    單克隆分離采用的是集流式細(xì)胞術(shù)和微流控技術(shù)于一體的新一代細(xì)胞分離技術(shù)。流式細(xì)胞儀的流體聚焦技術(shù)能夠極大地提高檢測(cè)靈敏度,另外微流控技術(shù)使得設(shè)備內(nèi)部的鞘液壓力可以降至2psi以下,也無(wú)需高頻振蕩,減少了分選過(guò)程對(duì)細(xì)胞的傷害,大大提高了分選出來(lái)的細(xì)胞的活性,適用脆弱細(xì)胞的分離。另外,一次性芯片真正實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞分選過(guò)程中,樣本之間的*隔離(從加樣到分離全都在芯片中完成)。
    “單克隆分離頭”利用聚丙稀導(dǎo)入頭細(xì)長(zhǎng)柔韌無(wú)斷裂且導(dǎo)通的特性,將試劑、糊劑等材料直接送入細(xì)長(zhǎng)多彎深孔處,有通過(guò)此分離頭將細(xì)胞分離,進(jìn)行克隆培養(yǎng)。應(yīng)用于醫(yī)療、環(huán)保、生化、測(cè)試等領(lǐng)域。
    離子交換是溫和條件下分離蛋白質(zhì)混合物的一個(gè)有用的技術(shù),常見的是應(yīng)用增加鹽濃度的緩梯度溶液進(jìn)行洗脫。pH梯度洗脫使用頻率較低(除專屬應(yīng)用外,例如色譜聚焦),并且需要復(fù)雜的緩沖液體系。盡管如此,單克隆分離能夠利用常規(guī)緩沖鹽實(shí)現(xiàn)pH梯度洗脫,在分離單克隆抗體帶電異構(gòu)體時(shí)的優(yōu)勢(shì)。
    單克隆分離方法:
    a、在培養(yǎng)皿中制備飼養(yǎng)細(xì)胞(小鼠腹腔細(xì)胞)單層。
    b、臨用前將2.0%瓊脂糖生理鹽水溶液與等量雙倍濃度的HT培養(yǎng)液混勻,配成1%瓊脂糖培養(yǎng)液,45℃水浴中溫育。
    c、吸去平皿上層培養(yǎng)液,加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液3ml,室溫10分鐘。
    d、取雜交瘤細(xì)胞懸液1ml,加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液1ml混勻,鋪于上層。
    e、37℃、7.5%濕潤(rùn)培養(yǎng)7-14天;克隆生長(zhǎng)至2mm時(shí),用毛細(xì)吸管吸出克隆,直接轉(zhuǎn)種于含有飼養(yǎng)細(xì)胞的24孔板,擴(kuò)大培養(yǎng)。
    f、吸取上清,檢測(cè)抗體,陽(yáng)性孔可繼續(xù)克隆化,或擴(kuò)大培養(yǎng)、凍存。
 

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