寬場成像是生命科學(xué)顯微成像中重要的方法之一。但限于其本身不能有效避免背景信號(hào)及多焦面間的信號(hào)互擾，因此主要被用于單層細(xì)胞或厚度不超過50 μm組織切片（圖1）。否則，過厚的樣本將導(dǎo)致寬場成像變的模糊而無法用于發(fā)表論文或數(shù)據(jù)分析，如厚病理切片、培養(yǎng)皿中大量生長的活細(xì)胞（尤其懸浮細(xì)胞）、微孔板中的Colony、模式動(dòng)物等樣本。

▲ 圖1. 大腦皮層神經(jīng)元普通寬場成像

β-III-微管（綠色），細(xì)胞核（藍(lán)色）

21 µm厚細(xì)胞團(tuán)59層普通寬場疊加圖像

您可能會(huì)說，我們可以用共聚焦成像嘛！

沒錯(cuò)，共聚焦顯微鏡的確可以對厚樣本內(nèi)部進(jìn)行清晰成像，當(dāng)然也可以進(jìn)行層掃進(jìn)而3D重建。但在實(shí)際使用中也存在局限性：

1、較寬場成像時(shí)間長，而很多生命過程十分迅速；

2、對于厚樣本，單層共聚焦圖像有時(shí)不能很好代表整體生物學(xué)信息，如單層共聚焦熒光成像往往不能有效代表腫瘤細(xì)胞球的整體蛋白表達(dá)。

2019萬物復(fù)蘇之際，

徠卡顯微系統(tǒng)隆重推出創(chuàng)新性產(chǎn)品——THUNDER 寬場高清成像系統(tǒng)！

THUNDER可以帶給您：

1、與普通寬場成像相同的成像速度！

2、與普通寬場成像大不相同的圖像清楚度！

3、與共聚焦相同的大樣本拼接、層掃和3D重建！

下面，讓我們一起去發(fā)現(xiàn)THUNDER帶來的寬場成像驚喜！

THUNDER Imager 3D Live Cell

▲ 圖2. 大腦皮層神經(jīng)元THUNDER疊加圖像
（vs 圖1. 普通寬場結(jié)果）

THUNDER Imager 3D Cell Culture

▲ 圖3. HeLa細(xì)胞球成像，Alexa Fluor 568-鬼筆環(huán)肽標(biāo)記細(xì)胞微絲（紅色）、YOYO 1碘化物標(biāo)記細(xì)胞核（綠色）