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大鼠elisa試劑盒酶標(biāo)板的問題

來源:上海一研生物科技有限公司   2018年10月09日 13:52  

      大鼠elisa試劑盒分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以 采 用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。做了十多次的ELISA,能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標(biāo)板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經(jīng)更換過,但是問題還是沒能解決,懷疑是酶標(biāo)板的問題。求教各位高手,有什么方法可以快速驗(yàn)證酶標(biāo)板的可靠性。

     一般來說,國外的是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度,如果你的樣品濃度低于該檢測下限,則無法檢測到,這是很正常的現(xiàn)象,并不是非要每個樣品都要測出值才可以。

     其次每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠,zui關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。

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