原代細(xì)胞由于過濾技術(shù)的提高和超凈臺質(zhì)量的改進(jìn),在規(guī)范的細(xì)胞培養(yǎng)操作過程中引進(jìn)污染的機(jī)會已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是,在常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多(比如組織培養(yǎng)),或者培養(yǎng)非常珍貴的細(xì)胞株時才使用抗生素。
抗生素雖然減少了可以觀察到的細(xì)菌、酵母等微生物的污染機(jī)會,卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會。
因為細(xì)胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧,而這些微粒和汽霧可以同時攜帶支原體、病毒和其他微生物。當(dāng)抗生素使用時,可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到,這樣支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會反而增加了。Barile的一項研究顯示72%持續(xù)使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞有支原體污染,而不使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞支原體污染的比例只有7%。
反過來如果不使用抗生素,支原體、病毒的污染往往會伴隨細(xì)菌和酵母等的污染。由于細(xì)菌和酵母等的污染很容易觀察到,污染細(xì)胞的及時清理就大大減少了支原體、病毒的污染機(jī)會。
潛在的支原體、病毒的污染會帶來很大的危害。這些微生物的存在會影響原代細(xì)胞的理化性質(zhì),從而使研究者得到錯誤的實驗結(jié)果。在嚴(yán)重的情況下,甚至使一個實驗室數(shù)年的研究白白浪費。
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原代細(xì)胞
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