薄層色譜實驗原理
1、原理: 薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附劑(固定相)和溶劑(移動相)之間進行分離。由于各種化合物的吸附能力各不相同,在展開劑上移時,它們進行不同程度的解吸,從而達到分離的目的。
2、薄層色譜的用途:
①化合物的定性檢驗。(通過與已知標(biāo)準物對比的方法進行未知物的鑒定) 在條件一致的情況,純碎的化合物在薄層色譜中呈現(xiàn)一定的移動距離,稱比移值(Rf值),所以利用薄層色譜法可以鑒定化合物的純度或確定兩種性質(zhì)相似的化合物是否為同一物質(zhì)。但影響比移值的因素很多,如薄層的厚度,吸附劑顆粒的大小,酸堿性,活性等級,外界溫度和展開劑純度、組成、揮發(fā)性等。所以,要獲得重現(xiàn)的比移值就比較困難。為此,在測定某一試樣時,用已知樣品進行對照。
Rf=原點到組分斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離
②快速分離少量物質(zhì)。 (幾到幾十微克,甚至0.01µg)
③跟蹤反應(yīng)進程。在進行化學(xué)反應(yīng)時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失,來判斷反應(yīng)是否完成。
④化合物純度的檢驗(只出現(xiàn)一個斑點,且無拖尾現(xiàn)象,為純物質(zhì)。) 此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。
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