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專家與您分享間接法操作elisa試劑盒

來源:上海通蔚實業(yè)有限公司   2017年08月09日 08:48  

elisa試劑盒進程如下:
1.首先用包被緩沖液將已知抗原稀釋到1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
2.第二日日洗刷3次;
3.加必定稀釋的待檢樣品(不知道抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗刷;
4.(一起做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,參與新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育30-60分鐘,洗刷; 6.’zui終一遍用DDW洗刷。
6.加底物液顯色:于各反應孔中參與暫時制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
7.中止反應:于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml。
8.效果斷定:可于白色布景上,直接用肉眼調(diào)查效果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號標明。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)矩的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
elisa試劑盒操作以上進程完畢后,就可以知道效果了。

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