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ELISA是以免疫學反響為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反響與酶對底物的催化作用相起來的一種敏感性很高的試驗技能。免疫酶技能是將酶標記在抗體/抗原分子上，構(gòu)成酶標抗體/酶標抗原，稱為酶物。該酶物的酶在免疫反響后，作用于底物使之呈色，依據(jù)色彩的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。
ELISA法是免疫酶技能的一種，其特點是使用聚苯乙烯微量反響板(或球)吸附抗原/抗體，使之固相化，免疫反響和酶促反響都在其間進行。在每次反響后都要重復洗刷，這既確保了反響的定量關(guān)系，也避免了末反響的游離抗體/抗原的別離進程。在ELISA法中。酶促反響只進行一次，而抗原、抗體的免疫反響可進行一次或數(shù)次，即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反響。
現(xiàn)在常用的幾種ELISA方法有：測定抗體的直接法，測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本試驗選用直接法測定單克隆抗體效價。其主要進程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反響板的凹孔內(nèi)，加待測抗體，保溫后洗刷以除掉未的雜蛋白質(zhì)，加酶標抗抗體，保溫后洗刷，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿停止酶促反響，用目測或光電比色測定抗體含量。
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