ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相聯(lián)絡起來的一種敏感性很高的實驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原分子上,構成酶標抗體/酶標抗原,稱為酶聯(lián)絡物。該酶聯(lián)絡物的酶在免疫反 應后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA 法是免疫酶技術的一種,其特點是運用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應和酶促反應都在其間進行。在每次反應后都要重復洗 滌,這既保證了反應的定量聯(lián)絡,也避免了末反應的游離抗體/抗原的分離進程。ELISA試劑盒在ELISA 法中。酶促反應只進行一次,而 抗原、抗體的免疫反應可進行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反應。
如今常用的幾種ELISA方法有:測定抗體的直接法,測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實驗選用直接法測定單克隆抗體效價。其主要進程為:首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應板的凹孔內,加待測抗體,保溫后洗刷以除掉未聯(lián)絡的雜蛋白質,加酶標抗抗體,保溫后洗刷,加底物保溫30分鐘后,加酸或堿中止酶促反應,用目測或光電
比色測定抗體含量。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。