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液相色譜儀HPLC紫外檢測器需要信噪比指標(biāo)

來源:上海萊??茖W(xué)儀器有限公司   2017年04月27日 11:41  

紫外檢測器液相色譜儀zui常用的檢測器,目前市場上生產(chǎn)廠家及型號很多,廠家通常采用檢測器的噪音,基線漂移等技術(shù)參數(shù)作為產(chǎn)品的靈敏度性能評價(jià)指標(biāo)??紤]到樣品的紫外吸收響應(yīng)值主要與樣品有關(guān),與儀器的關(guān)系不大,一般認(rèn)為這可以基本反映儀器在靈敏度方面的性能。

本文在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上證明對同一樣品各檢測器的響應(yīng)值實(shí)際上也存在不同程序的差異,說明僅使用噪音和基線漂移的指標(biāo)不能準(zhǔn)確顯示儀器在靈敏度方面的性能差異,因此,提出用信噪比來評價(jià)儀器的靈敏度性能。

1.靈敏度評價(jià)指標(biāo)設(shè)置的目的和依據(jù)
液相色譜及其紫外檢測器主要用于化學(xué)樣品的分析測試。其評價(jià)指標(biāo)必然與其用途相關(guān)聯(lián)。一個(gè)分析方法對檢測器的要求主要在靈敏度、選擇性、度和準(zhǔn)確性方面。在色譜分析中靈敏度是非常重要的指標(biāo)。對于靈敏度,在分析測試方法研究中主要使用信噪比、zui低檢測限,或zui低定量限來評價(jià)。其中信噪比是評價(jià)的核心,因?yàn)閦ui低檢測限和zui低定量限通常用信噪比在2~3和10的量來定義。

但目前廠家通常采用檢測器的噪音,基線漂移等技術(shù)參數(shù)作為產(chǎn)品的靈敏度性能評價(jià)指標(biāo)。這實(shí)際上是基于樣品的紫外吸收響應(yīng)值主要與樣品有關(guān),與儀器關(guān)系不大的假設(shè)。根據(jù)朗伯比爾定律,對于同樣長度的檢測池,同樣濃度的樣品溶液應(yīng)該具有相同的吸光度。這樣,對同樣濃度的樣品溶液,檢測器的響應(yīng)值應(yīng)該是相同的,所以上述噪音,基線漂移的參數(shù)應(yīng)該可以用來評價(jià)檢測器的靈敏度性能。

但是,實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),同一樣品溶液在不同檢測器中響應(yīng)實(shí)際上存在明顯差異,表1顯示對于同一種樣品溶液,不同廠家和型號檢測器的響應(yīng)值可能相差3倍以上。這時(shí),由于色譜分析主要使用相對比較的間接測定方法,其使用實(shí)際上并沒有受到多少影響。難以簡單認(rèn)定儀器存在問題。但因?yàn)樾旁氡劝l(fā)生了變化,上述噪音、基線漂移的參數(shù)就不能用來評價(jià)檢測器的靈敏度性能了。


此時(shí),直接使用信噪比來評價(jià)檢測器的靈敏度性能才是可靠和準(zhǔn)確的方法。

2. 信噪比指標(biāo)評價(jià)方法
評價(jià)信噪比需要測定響應(yīng)值,需要選定樣品,推薦萘和L-苯丙氨酸等在254nm附近有吸收的樣品,前者常用于色譜柱性能評價(jià);后者無毒,且對儀器可能存在的偏振現(xiàn)象敏感。當(dāng)然,即使使用不同的評價(jià)樣品,只要固定濃度和溶劑,也可以用分光光度計(jì)來校正和比較。

根據(jù)現(xiàn)有信噪比測定方法,在選定特定濃度的樣品后,先在選定波長平衡檢測器(此時(shí)檢測器中的溶液為溶解評價(jià)樣品的溶劑),待基線穩(wěn)定后,將配制好的樣品溶液直接灌注到儀器的流路并充滿其中,注意不要灌入氣泡,信號穩(wěn)定后再用溶劑將樣品溶液沖出來。測定基線上下波動(dòng)的幅度為噪音值(N),測定基線中值與樣品信號中值的差為信號值(S)。則信噪比為兩者的比值(SN)。

3. 結(jié) 論
使用信噪比(SN)指標(biāo)評價(jià)檢測器,可以更準(zhǔn)確全面地評價(jià)各種檢測器的靈敏度性能。評價(jià)時(shí)可以參考現(xiàn)有的信噪比測定方法,建議用254nm作為檢測波長,選擇簡單易得的樣品,濃度值的選定應(yīng)使信噪比SN的值在10以內(nèi),以方便測量。配制特定濃度的評價(jià)溶液后,以灌注法測定此時(shí)相對溶劑的響應(yīng)值S,測定和計(jì)算出信噪比SN的值,作為該檢測器對特定評價(jià)樣品溶液的信噪比評價(jià)指標(biāo)的值。

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