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雙熒光素技術2022/5/23

熒光素酶報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測熒光素酶活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生...

細胞凋亡誘導技術2022/5/19

【實驗方法與步驟】（1）細胞凋亡的誘導：HeLa細胞常規(guī)傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期(見細胞傳代培養(yǎng)）。實驗組細胞加入順鉑溶液（生理鹽水配置）至終濃度為20μmo1/L,37℃，5%CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)?？瞻?..

Transwell實驗技術2022/5/19

微孔濾膜培養(yǎng)小室及雙室聯(lián)合培養(yǎng)系統(tǒng)（Transwell實驗）：應用微孔濾膜培養(yǎng)小室，進行膠質瘤細胞與內皮細胞的聯(lián)合培養(yǎng)，可以更接近體內環(huán)境，模擬瘤細胞對血管內皮細胞的作用，濾膜上8μm的微孔可允許內皮...

活力染色技術2022/5/19

一、實驗原理各種細胞操作，包括傳代、凍存和原代組織的分離，均能導致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數(shù)，可采用臺盼藍染料排斥實驗（Phillips1973)。正常的健康細胞能排斥染料，但細胞膜完整...

細胞轉染技術2022/5/19

一、細胞轉染細胞轉染是指將外源分子如DNA，RNA等導入真核細胞的技術。常規(guī)轉染技術可分為瞬時轉染和穩(wěn)定轉染兩大類。本實驗室主要是質粒轉染、miRcroRNA轉染、慢病毒轉染、藥物轉染、多肽轉染等。二...

流式細胞術檢測細胞周期2022/5/19

流式細胞術檢測細胞周期1。實驗原理用流式細胞儀檢測細胞周期，通常用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染細胞核。PI在一定波長的光下發(fā)出熒光，其強度與DNA含量成正比。通過流式細胞儀分析各...

一般慢性炎癥的基本病理變化2022/5/14

1、炎癥灶內主要是巨噬細胞、淋巴細胞和漿細胞浸潤。單核吞噬細胞的浸潤對慢性炎癥十分重要。單核細胞從血管游出后轉化為巨噬細胞。巨噬細胞還可被激活。在炎癥灶局部巨噬細胞的積聚有三方面的原因：①由于從炎癥灶...

激光掃描共聚焦顯微鏡操作步驟及注意事項2022/5/14

激光掃描共聚焦顯微鏡可測定的樣品種類很多．包括生物材料、組織(切片)、細胞(亞細胞)結構等。樣品中熒光的來源主要有如下幾種：自發(fā)熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、...

人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉移模型的建立實驗2022/5/14

人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉移模型的建立：（1）探討肺癌遠處轉移和阻斷其遠處轉移的研究；（2）模擬晚期非小細胞肺癌轉移的自然發(fā)生過程；（3）在活體動物的完整器官內評估瘤細胞播散和腫瘤的生長。實驗方法原...

人胃癌高轉移模型2022/5/14

人胃癌高轉移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉移機制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉移研究提供更為理想的動物模型。腫瘤組織塊原位移植法實驗方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠...

人胰腺癌裸小鼠模型2022/5/14

人胰腺癌裸小鼠模型實驗方法原理將人胰腺癌細胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養(yǎng)...

多重 PCR 擴增實驗2022/5/7

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高P...

免疫熒光實驗方法中需要注意的環(huán)節(jié)2022/5/7

免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內部結構破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰...

組織切片的免疫熒光標記實驗2022/5/7

免疫熒光標記技術（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

腫瘤細胞體外傳代培養(yǎng)及保種2022/5/7

一.細胞復蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質混勻細胞沉淀，再150...