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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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蛋白質(zhì)檢測(cè)

時(shí)間:2022/4/23閱讀:1652
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蛋白提取

組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織)

1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開(kāi)腹腔,剪切肝臟組織。

2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL

3、稱(chēng)取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。

4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF20ug/2ml)。

5、2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。

6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。

7、4℃,15000rpm,離心10min

8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。

9、進(jìn)行蛋白定量,-80℃保存。

蛋白提取

組織樣本總蛋白提取(小鼠肝組織)

1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開(kāi)腹腔,剪切肝臟組織。

2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL

3、稱(chēng)取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。

4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF20ug/2ml)。

5、2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。

6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。

7、4℃,15000rpm,離心10min。

8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。

9、進(jìn)行蛋白定量,-80℃保存。


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