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細(xì)胞凍存方法的改進

時間：2011/11/15閱讀：746

細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。

凍存技術(shù)要點是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min。我們常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。但是由于步驟較多，時間間隔較長，很容易遺忘。但是任何一個步驟的拖延都會嚴(yán)重影響細(xì)胞存活。而市面上程序冷凍儀又價格昂貴，必要性也不高，不是每個實驗室都擁有的。

方法改進：我們考慮到泡沫塑料有很好的保溫隔熱效果，同時又注意到我們購買的BD公司的15ml離心管包裝里的泡沫塑料孔徑與凍存管相當(dāng)。我們改進的凍存方法是：可將細(xì)胞凍存管放入泡沫支架中，再加蓋一塊同樣的泡沫支架后，直接放入-80℃冰箱過夜后轉(zhuǎn)移進液氮罐。該方法不但利用了廢物利于環(huán)保，而且省時省心，非常便捷有效。

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