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舜宇恒平符合國標的三聚氰胺快速液相色譜檢測法

閱讀：3215 發(fā)布時間：2008/11/18

上海舜宇恒平科學儀器有限公司按照GB/T 22400-2008 《原料乳中三聚氰胺快速檢測　液相色譜法》，對鮮牛奶中三聚氰胺進行快速檢測，經(jīng)優(yōu)化色譜條件，三聚氰胺的出峰時間在7min左右，并能與雜質(zhì)峰達到基線分離，完整分析一個樣品（包括前處理）的整個實驗過程在20min以內(nèi)。

1.儀器與試劑

LC1620液相色譜儀（含UV1620紫外-可見檢測器1臺，P1620高壓恒流泵1臺，上海舜宇恒平科學儀器有限公司）；FA2004電子分析天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）；三聚氰胺標準品（>99%，上海安譜）；磷酸二氫鉀（分析純）；磷酸（分析純）、乙腈（色譜純，美國Tedia）、二次蒸餾水。

2.標準品溶液配制

精密稱取三聚氰胺標準品，溶于水，配制成1.0mg/mL的標準儲備液，于4℃避光保存。根據(jù)實驗需要，用流動相逐級稀釋成適當濃度的標準工作液。

3.樣品前處理

稱取15g樣品于50ml具塞離心管中，加入乙腈30ml，劇烈震蕩6min，加水至滿容刻度，充分混勻后靜置3min，取上清液，0.22um濾膜過濾，作為HPLC測定溶液。

4.色譜條件：

色譜柱：Venusil SCX 5μm（ID4.6mm×250mm）

流動相：乙腈/緩沖鹽=30/70（緩沖鹽：80mM磷酸緩沖液，用磷酸調(diào)pH3.0）

流速：1.5ml/min

波長：240nm

進樣量：20μl

5.精密度實驗

取濃度為2μg/mL三聚氰胺標準工作液，按上述色譜條件，連續(xù)進樣6次，以各成分峰面積計算RSD（%），所得結(jié)果如表1所示：保留時間相對標準偏差（RSD）為0.10％，峰面積RSD為0.69％。

表1 精密度實驗

NO.	Retention time（min）	Peak High	Peak Area
1	7.240	1060	9854.7
2	7.232	1062	9815.3
3	7.223	1043	9805.0
4	7.223	1088	9869.5
5	7.223	1052	9681.4
6	7.223	1070	9841.3
RSD（%）	0.10	0.96	0.69

圖1 三聚氰胺標準品色譜圖

6.標準曲線

1）配置濃度分別為0.2、0.5、2.0、5.0、20.0、50.0μg/mL的三聚氰胺標準工作液。將以上6種標準工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進樣。以對照品濃度（橫坐標X軸，μg/mL）對峰面積（縱坐標Y軸）進行線性回歸，求算標準曲線，結(jié)果如下：

y = 4810.3x + 137.52 r = 0.9999

2）配置濃度分別為0.005、0.01、0.02、0.5、0.2μg/mL的三聚氰胺標準工作液。將以上5種標準工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進樣。以對照品濃度（橫坐標X軸，μg/mL）對峰面積（縱坐標Y軸）進行線性回歸，求算標準曲線，結(jié)果如下：

y = 4116.2x + 17.618 r＝0.9992

7.加樣回收率和重現(xiàn)性實驗

取已知三聚氰胺含量的牛奶樣品，加入一定量的標準儲備液，按“樣品前處理” 操作，平行制備3份，得到樣品溶液后按上述色譜條件進樣分析，得到加樣回收率及重現(xiàn)性結(jié)果，三次測定RSD為1.89％，加樣回收率為100.6％。

圖2 空白牛奶樣品色譜圖

圖3 加標牛奶樣品色譜圖

8.檢測限及定量限

依據(jù)噪聲值，按3倍信噪比，計算三聚氰胺的理論檢出限，為0.04 mg/kg。

具體內(nèi)容進行咨詢。

上海舜宇恒平科學儀器有限公司是上海市高新技術(shù)企業(yè)，專業(yè)致力于各類科學儀器的研發(fā)、制造和銷售。公司與多所高校、科研機構(gòu)建立了密切的合作聯(lián)盟，多次承擔上海市科委科學儀器攻關(guān)項目，已成為科學儀器的產(chǎn)學研自主創(chuàng)新基地。公司已形成在四大領(lǐng)域，即分析儀器、天平儀器、物性測試儀器和前處理儀器共計一百多個品種的數(shù)字化、智能化產(chǎn)品，建立了與顧客的營銷網(wǎng)絡(luò)，客戶遍及海內(nèi)外。

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