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(瘦肉精)鹽酸克倫特羅及萊克多巴胺的檢測方案

閱讀:3692      發(fā)布時間:2011-3-22
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動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(GB/T 22286-2008(瘦肉精)鹽酸克倫特羅及萊克多巴胺的檢測

試樣中的殘留物經(jīng)酶解,用高氯酸調(diào)節(jié)pH值,沉淀蛋白后離心,上清液用異丙醇-乙酸乙酯提取,再用陽離子交換柱凈化,液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定,內(nèi)標法定量。

該檢測方法基本操作步驟如下:

稱取2g混合均勻的樣品與50mL離心管中,加入8mL乙酸鈉緩沖液,充分混勻,再加入50µL β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶,混勻后37水解12小時。添加100µL 10ng/mL的內(nèi)標液與待測樣品,振蕩15min,5000r/min離心10min。取4mL 上清液加入0.1M 高氯酸溶液5mL,用濃高氯酸溶液調(diào)節(jié)pH1±0.35000r/min離心10min,全部上清液轉(zhuǎn)移到50mL離心管,用10M的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH11。加入10mL飽和氯化鈉溶液和10mL異丙醇/乙酸乙酯(6:4)混合溶液提取,5000r/min離心10min。轉(zhuǎn)移全部有機相,40水浴氮吹吹干。加入5mL 乙酸鈉超聲溶解。

MCX小柱用3mL甲醇和3mL去離子水活化,帶5mL凈化液上樣,依此用2mL去離子水、2mL 2%甲酸水溶液和2mL甲醇洗滌柱子并抽干。2mL5%氨水甲醇溶液洗脫收集。流速控制在0.5mL/min,洗脫液40水浴氮吹吹干。加入200µL 0.1%甲酸/-甲醇溶液(95:5),超聲,15000r/min離心10min。


 

 



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