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dsRNA（double-stranded RNA）即雙鏈RNA，由兩條互補的核苷酸鏈通過堿基配對形成，它在調(diào)控基因表達(dá)、激活免疫反應(yīng)以及RNA干擾技術(shù)中扮演著關(guān)鍵角色。dsRNA也是某些病毒的遺傳物質(zhì)，能夠觸發(fā)宿主細(xì)胞的天然免疫反應(yīng)。

dsRNA的形成機制

第一種機制：基于T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）本身具有的RNA依賴性RNA聚合酶（RdRp）活性，能夠以產(chǎn)物RNA為模板，3'末端繼續(xù)延伸RNA后與原RNA分子反向互補配對形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)；或者是在轉(zhuǎn)錄過程中，隨機斷裂的/不完整的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與mRNA互補配對從而延伸成不完整的雙鏈RNA。

第二種機制：以DNA反義鏈為模板，獨立于啟動子的轉(zhuǎn)錄過程形成dsRNA

圖1 dsRNA復(fù)制示意圖

dsRNA經(jīng)典克隆

J2克隆

J2單克隆抗體（Anti-dsRNA mAb J2）是dsRNA檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，具有高度特異性。它最初用于植物病毒的研究，但自從Weber等人在2006年的開創(chuàng)性論文發(fā)表以來，J2被用來證明所有正鏈RNA病毒在感染的細(xì)胞中產(chǎn)生的大量dsRNA。

K2克隆

K2單克隆抗體（Anti-dsRNA mAb K2）是另一種抗dsRNA的單克隆抗體，主要用于ELISA和夾心法ELISA實驗，K2主要用于ELISA和夾心法ELISA，在高背景環(huán)境中仍能精準(zhǔn)識別dsRNA，尤其在高濃度L-dsRNA和長時間孵育條件下，顯示出對天然dsRNA結(jié)合能力較強的特性。

dsRNA的生物學(xué)意義

1. dsRNA通常被視為病毒感染的標(biāo)志，因為許多病毒（尤其是雙鏈RNA病毒）以dsRNA作為其基因組或復(fù)制中間體。例如正鏈RNA病毒（+ssRNA）在復(fù)制時會先合成負(fù)鏈RNA（-ssRNA），形成dsRNA，然后再從負(fù)鏈RNA合成更多的正鏈RNA。

圖2 病毒感染后產(chǎn)生的dsRNA被RIG-I、MDA5和TLR3等受體識別，觸發(fā)IFN-β的產(chǎn)生，進(jìn)而激活I(lǐng)SGs，包括OAS和IFN-α，形成抗病毒反應(yīng)的正反饋循環(huán)。抗IFN-α抗體中和IFN-α，抑制ISGs的誘導(dǎo)，削弱免疫反應(yīng)，影響病毒清除。

2. 在mRNA疫苗和治療中，dsRNA作為副產(chǎn)物在體外轉(zhuǎn)錄（IVT, In Vitro Transcription）制備mRNA過程中產(chǎn)生，能夠被細(xì)胞內(nèi)的核酸受體識別，例如TLR3、MDA5或者RIG-I，進(jìn)而引發(fā)天然免疫炎癥反應(yīng)。

圖3 在 IVT 反應(yīng)過程中形成 3′-延伸的 RNA 副產(chǎn)物。（A） 使用 dsRNA 特異性抗體 （J2） 對三種不同的 mRNA 序列（CLuc、RFP 和 GFP）進(jìn)行 dsRNA檢測。

3. 免疫信號通路中，dsRNA作為重要的病原分子模式（PAMPs），能夠激活天然免疫系統(tǒng)中的關(guān)鍵受體（如RIG-I、MDA5和TLR3）。這些受體通過識別dsRNA，引發(fā)干擾素（IFN）等抗病毒分子的產(chǎn)生，從而觸發(fā)強大的免疫反應(yīng)。

dsRNA結(jié)合后，NLRP1觸發(fā)其UPA和CARD結(jié)構(gòu)域的釋放，組裝炎癥體種子，誘導(dǎo)炎癥體形成并激活caspase 1。激活的caspase 1切割炎癥細(xì)胞因子前體（如IL-1β和IL-18）和一個形成孔洞的蛋白gasdermin D（GSDMD）。GSDMD孔洞在質(zhì)膜上形成，誘導(dǎo)焦亡，這是一種炎癥形式的細(xì)胞死亡。

圖4 dsRNA作為觸發(fā)RIG-I（Retinoic Acid-Inducible Gene I）和MDA5（Melanoma Differentiation-Associated Protein 5）識別的分子模式，從而啟動先天免疫反應(yīng)。

dsRNA不僅在理解病毒感染機制和宿主免疫反應(yīng)中扮演著關(guān)鍵角色，而且在開發(fā)新的抗病毒策略和疫苗技術(shù)方面具有重要價值。通過對dsRNA的形成機制、識別受體以及其在免疫激活中的作用的深入研究，科學(xué)家們能夠更好地理解病毒如何逃避或操縱宿主的天然免疫反應(yīng)，以及如何設(shè)計更有效的疫苗和治療藥物來對抗病毒感染。

兔單克隆抗體優(yōu)勢

斯達(dá)特上架抗dsRNA抗體，引用經(jīng)典克隆J2和K2，高批間一致性和高靈敏度；還有更多相關(guān)的高純度、高活性蛋白，為廣大客戶提供高品質(zhì)抗體蛋白。