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中級(jí)會(huì)員 | 第1年

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ELISA試劑盒檢測血清的留意事項(xiàng)有哪些?

時(shí)間:2025/6/16閱讀:245
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ELISA試劑盒檢測血清的詳細(xì)留意事項(xiàng):

 

1) 要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色。

 

2) 冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。

 

3) 標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢測。

 

4) 樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測定方法發(fā)生非特異性攪擾。

 

5) 血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則可以在28℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。


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