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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96162 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：CC96162
產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。
產品介紹
BW25113感受態(tài)
產品簡介
BW25113 菌株來源于 E. coli K12 W1485，是 K12 的衍生菌株，與 MG1655 類似，也是一種經過較
少改造，比較接近于“野生型"的大腸桿菌工程菌株。BW25113 作為母系菌株，可以用來制作 E. coli
Keio Knockout 文庫；同時可作為大腸桿菌模式菌株使用，用來制作各種基因的 Knockout 突變體。
另外，BW25113 可用于構建、擴增質粒使用，但是不含核酸酶 endA1 突變，因此體內核酸酶含量
較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶，以防提取的質粒被降解。
BW25113 感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
BW25113 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F-, DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
BW25113感受態(tài)
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