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在這里，我們展示了使用Gibco™ CTS™ Dynabeads™ CD3/CD28磁珠可以使初始和早期記憶T細胞幾乎100%恢復。這種同時進行T細胞分離和活化的一步法產(chǎn)生純凈而且均勻活化的T細胞。用CTS Dynabeads CD3/CD28擴增的CD4+和CD8+ T細胞在第10天維持早期記憶表型并且具有增加的克隆多樣性。早期去除磁珠是可行的并且提高γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導效率。CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠可提供可靠的結(jié)果，已用于80多種臨床試驗和商業(yè)T細胞藥物生產(chǎn)中。
在制造過程中(圖1)，從患者(或T細胞供體)收集外周血單核細胞(PBMC)并轉(zhuǎn)移至GMP廠房，其中T細胞在CTS DynabeadsCD3/CD28磁珠的存在下被分離和激活，通過病毒轉(zhuǎn)導進行基因工程改造以表達嵌合抗原受體(CAR)。將活化的T細胞在補充有Gibco™ CTS™免疫細胞血清替代物的Gibco™CTS™ OpTmizer™ T細胞擴增無血清培養(yǎng)基(SFM)中擴增一段時間，通常為7–10天，以達到治療相關數(shù)量。然后通過去除磁珠來收獲它們，并配制用于冷凍或過繼轉(zhuǎn)移。