凝膠色譜憑借其溫和的分離條件、可量化的分離效果，已成為現(xiàn)代分離科學中不可少的工具。隨著新型填料和檢測技術(shù)的突破，其在準確醫(yī)療、新材料研發(fā)等領(lǐng)域的應用前景將更加廣闊。
現(xiàn)代凝膠色譜儀通常包含五大模塊：
1.輸液系統(tǒng)：高壓恒流泵(可達5000 psi)確保流動相穩(wěn)定輸送；
2.進樣系統(tǒng)：自動進樣器支持多樣品序列分析；
3.色譜柱：填充球形硅膠或瓊脂糖凝膠(粒徑3-10μm)，理論塔板數(shù)可達105/m；
4.檢測器：紫外檢測器(波長254/280nm)、示差折光檢測器(RI)或多角度激光光散射檢測器(MALS)；
5.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：配備GPC軟件進行分子量校準與譜圖解析。
凝膠色譜儀的測定步驟：
1.樣品準備：將待測樣品溶解在適當?shù)娜軇┲?，確保樣品溶解且無雜質(zhì)。對于生物樣品，可能需要進行預處理，如離心、過濾等，以去除不溶物和雜質(zhì)。
2.色譜柱裝填：選擇合適的凝膠填料，根據(jù)實驗要求裝填到色譜柱中。裝填過程中要確保凝膠均勻分布，無氣泡和裂縫。
3.流動相選擇：根據(jù)樣品的性質(zhì)和實驗要求，選擇合適的流動相。流動相應能夠溶解樣品，并與凝膠填料相容。
4.樣品進樣：將準備好的樣品通過進樣器注入到色譜柱的頂部，確保樣品均勻分布在凝膠表面。
5.洗脫與分離：開啟流動相，使其通過色譜柱。由于凝膠的分子篩效應，不同大小的分子將以不同的速度在色譜柱中移動，從而實現(xiàn)分離。
6.檢測與記錄：使用適當?shù)臋z測器(如紫外檢測器、示差折光檢測器等)監(jiān)測流出的液體，并記錄各組分的保留時間和峰面積等信息。
7.數(shù)據(jù)處理與分析：根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，計算各組分的相對分子質(zhì)量、含量等信息，并進行進一步的分析和討論。
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