脂質(zhì)體和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是常用的基因遞送技術(shù)，它們能把DNA、siRNA、mRNA等分子送到真核細胞中，用于各種研究和藥物開發(fā)。今天我們來談?wù)?/span>脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方。
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑主要由脂質(zhì)體、DNA、緩沖液和穩(wěn)定劑組成。脂質(zhì)體是一種包裹DNA的物質(zhì)，能把它送進細胞。它的配方包括正電荷脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、膽固醇和PEG。緩沖液負責調(diào)整pH值和離子強度，有助于提高轉(zhuǎn)染效率。穩(wěn)定劑則保護所有這些東西，防止在制備過程中降解。
常見的一種脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑配方如下：
* 1,2-二棕櫚酸-3-辛?；?甘油（DOTAP）50μg + 膽固醇10μg + 磷酸二氫鈉2.5μg + 氯化鈉150mM + 無菌水10ml。
制作方法：
1. 把DOTAP和膽固醇溶于氯仿中，制成脂質(zhì)體溶液。
2. 把緩沖液的無菌水和氯化鈉溶液混合。
3. 把脂質(zhì)體溶液和DNA混合，再加入緩沖液中，輕輕攪勻。
4. 靜置15-30分鐘，讓脂質(zhì)體和DNA充分結(jié)合。
5. 將混合物滴入細胞培養(yǎng)皿，進行轉(zhuǎn)染。
不同的細胞系和DNA片段可能需要不同的轉(zhuǎn)染試劑配方和條件。所以在開始實驗前，最好先優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑的配方和條件。
總的來說，了解脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方和制備方法對更好地開展研究十分有幫助。
本期內(nèi)容：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方
下期內(nèi)容：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑與非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的區(qū)別
3
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務(wù)