化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
檢測循環(huán)腫瘤細(xì)胞中miRNA的新技術(shù)
閱讀：434 發(fā)布時間：2015-4-1越來越多的證據(jù)表明，循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)中的micrornA具有診斷和預(yù)后的潛力。然而，檢測卻并非易事。近日，西班牙的研究人員在《Science Reports》上介紹了一種方法，能利用原位雜交檢測這種小的非編碼RNA。
CTC是從原發(fā)性腫瘤脫落，然后進入循環(huán)系統(tǒng)的一種細(xì)胞。它們到達(dá)其他的組織或器官，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移。鑒于近年來CTC檢測技術(shù)的進步，研究人員能夠利用這些上皮細(xì)胞來監(jiān)測癌癥進展，并跟蹤患者對治療的反應(yīng)。
盡管如此，大多數(shù)CTC分析的靈敏度較低。據(jù)GENYO研究團隊介紹，這主要是因為只有少量的上皮標(biāo)志物可用來鑒定和分離全血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞，通常是上皮細(xì)胞粘附分子(EpCAM)和細(xì)胞角蛋白(CK)。然而，這些上皮細(xì)胞也可能來自其他上皮組織，而并非腫瘤。
讓事情更加復(fù)雜的是，數(shù)據(jù)表明存在一部分CTC，不表達(dá)EpCAM或CK。相反，這些細(xì)胞表現(xiàn)出上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的特征。這個過程與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)，其中上皮細(xì)胞呈現(xiàn)出間質(zhì)特征，促進遷移、入侵和抗凋亡。
基于這些原因，探索CTC中miRNA的生物標(biāo)志物潛力受到了限制。為了解決這個問題，GENYO的研究人員開發(fā)出一種稱為MishCTC的方法，將原位雜交方法以及基于CK表達(dá)的免疫磁性選擇和免疫細(xì)胞化學(xué)相結(jié)合，利用鎖核酸(LNA)探針來檢測miRNA。
為了驗證這種技術(shù)，研究人員選擇了miR-21，這種miRNA靶定多個腫瘤抑制基因，而且在癌細(xì)胞中表達(dá)而不在造血細(xì)胞中表達(dá)，因此是檢測CTC的理想標(biāo)志物。
他們獲得了25例轉(zhuǎn)移性癌癥患者的外周血樣本，并利用MishCTC方法開展了分析。在這25個樣本中，11個樣本含有表達(dá)CK和miR-21的CTC。對于CK表達(dá)丟失的EMT誘導(dǎo)的上皮腫瘤細(xì)胞系(MCF-7)，MishCTC技術(shù)也成功追蹤了miR-21的表達(dá)，表明miR-21可能是檢測EMT表型的CTC的一個很好的標(biāo)志物。
據(jù)作者介紹，這些數(shù)據(jù)*次證明了原位雜交方法可以用于CTC中miRNA的鑒定。他們目前正在招募大批的癌癥患者，以便根據(jù)miRNA的表達(dá)來研究CTC的異質(zhì)性。
來自生物幫
大家想要了解更多的資訊與信息，歡迎隨時，只要掃描下方的二維碼，即可關(guān)注我們“譽維生物"訂閱號及公眾號。