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一

首先來看下它的原理：

免疫親和柱（immnuo affinity chromatography columns,IAC）是利用免疫親和層析原理即利用生物大分子具有對某一類生物大分子特異識別和可逆結(jié)合的特性而制成，用以分析檢測抗體或抗原的親和層析柱。

二

其次，它的組成及其作用

一支完整的免疫親和柱由以下六部分組成，其中：

柱管：分為1ml和3ml兩種規(guī)格，不同規(guī)格的對應(yīng)的柱容量不同；
固定相：瓊脂糖凝膠；
包被在固定相上的抗體：瓊脂偶聯(lián)特異性抗體，為反應(yīng)主體關(guān)鍵部分；
保護(hù)液：通常是緩沖溶液保持瓊脂潤濕；
篩板：孔徑20um；
上下頂蓋：主要是防止保護(hù)液流失。

三

接下來，怎么使用？

使用前先將親和柱恢復(fù)至室溫，放掉柱子的保護(hù)液，然后進(jìn)行上樣、淋洗、洗脫過程。

四

實驗中小Tips：

1、上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高；

2、若樣品為復(fù)雜樣品，例如高蛋白、高油脂、酸性樣品，可以將提取液分兩次提取樣品，可以提高提取效果；

3、樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻，約每秒1-2滴；

4、抗原抗體發(fā)生反應(yīng)的最佳溫度是在25℃左右，實驗需要的環(huán)境溫度最好是室溫24℃-28℃ ，太高或太低的溫度都會對親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前需要恢復(fù)至室溫再進(jìn)行實驗；

5、親和柱不要在無水狀態(tài)下，瓊脂容易干燥，影響親和柱的質(zhì)量；

6、親和柱儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫，因為緩沖液凍結(jié)，會嚴(yán)重影響親和柱內(nèi)的物理結(jié)構(gòu)，對親和柱的質(zhì)量影響很大；

7、洗脫一般選擇試劑甲醇，為增強(qiáng)洗脫效果可加大甲醇體積；

8、樣液免疫親和柱凈化后，洗脫液過0.45um或更小孔徑濾膜效果更好。

附免疫親和柱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

食品標(biāo)準(zhǔn)

飼料標(biāo)準(zhǔn)

糧油標(biāo)準(zhǔn)

海關(guān)標(biāo)準(zhǔn)