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玉米粉中玉米赤霉烯酮的測定

閱讀:1133        發(fā)布時間:2023-1-9
玉米霉烯酮的介紹

玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又稱F-2毒素,主要由粉紅鐮刀菌和禾谷鐮刀菌產(chǎn)生,它首先從有赤霉病的玉米中分離,廣泛存在于霉變的玉米、小麥、高粱等谷類作物中,其中玉米的陽性檢出率為45%,最高含毒量可達到2909 mg/kg;小麥的檢出率為20 %,含毒量為0.364~11.05 mg/kg。玉米赤霉烯酮的耐熱性較強,110 ℃下處理1 h才能被破壞。玉米赤霉烯酮具有很強的生殖毒性,可引發(fā)動物雌激素亢進癥,導致妊娠期動物發(fā)生流產(chǎn)、死胎等生殖機能異常。食用含赤霉病麥面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀,如發(fā)冷、頭痛、神智抑郁等。


玉米霉烯酮的食品安全規(guī)定


我國食品安全國家標準《GB 2761-2017》規(guī)定玉米赤霉烯酮在玉米、玉米粉及其制品中最大為60 μg/kg。


冠一生物開發(fā)出使用免疫親和方法檢測玉米粉中玉米赤霉烯酮的含量,平均回收率在95.9 %,RSD 2.09 %,為客戶提供關(guān)于玉米赤霉烯酮檢測有效的解決方案。


實驗目的


本研究利用免疫親和柱法作為樣品的前處理方法,HPLC作為分析方法,檢測玉米粉中玉米赤霉烯酮的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程,節(jié)省有機溶劑的使用,操作簡便。


實驗目標物


玉米赤霉烯酮(CAS:17924-92-4)


應用范圍


本方法適用于玉米粉中玉米赤霉烯酮的HPLC檢測及確證。



實驗方法
1.樣品提取

稱取5.0 g(精確到0.01 g)玉米粉到50 mL離心管,加入1 g NaCl和20 mL70%甲醇水溶液,振蕩30 min,4000 r/min下離心5 min,取上清液1mL于15 mL離心管中,加水4 mL,混勻待凈化。

2.免疫親和柱凈化 

(1)取待凈化樣品1 mL以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱,棄掉流出的液體;

(2)加入20 mL水淋洗柱子,分兩次淋洗,棄掉流出的液體;

(3)真空吹干柱子中殘留水分;

(4)加入3 mL甲醇緩慢洗脫親和柱,流速約為2-3秒/滴;

(5)50 ℃下氮吹至近干,加1 mL50%乙腈水溶液溶解,0.22 μm濾膜過濾,供HPLC分析。

3.HPLC條件

設(shè)   備:Waters Alliance 2695

色譜柱:Inertsustain C18(4.6*250 mm,5 μm)

檢測器:2475 熒光檢測器

檢測波長:激發(fā)波長: 274 nm /發(fā)射波長: 440 nm

流動相:乙腈:水:甲醇=46:46:8

流速:1 mL/min

進樣體積:20 μL

實驗結(jié)果

1、1 mg/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮的添加回收結(jié)果

表1  1 mg/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮的添加回收結(jié)果

圖片

2、添加水平為1 mg/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮的液相色譜圖

圖片

圖1  添加水平為1 mg/kg玉米粉中玉米赤霉烯酮的液相色譜圖


結(jié)論:玉米粉中玉米赤霉烯酮含量檢測的平均回收率是95.9%,RSD是2.09%,滿足標準要求。



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