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重組蛋白的相關(guān)介紹
閱讀：627 發(fā)布時間：2022-11-25
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。在知道編碼該蛋白的基因序列之后，人工克隆該基因進(jìn)入質(zhì)粒。然后再把質(zhì)粒轉(zhuǎn)染如大腸桿菌。這樣大腸桿菌就成了蛋白表達(dá)的工廠。表達(dá)出來的蛋白再進(jìn)過分離純化，就是重組蛋白。
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達(dá)，哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)，酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，提高表達(dá)成功率。
重組蛋白有三種較為廣泛使用的表達(dá)系統(tǒng)，即大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)和CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。其中，大腸桿菌是表達(dá)重組蛋白較常用的宿主菌，已應(yīng)用于許多具有重要藥用價值的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有生長速度快、培養(yǎng)成本低、遺傳背景清晰、易于實(shí)現(xiàn)高密度培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn)。大腸桿菌DH5α是一種突變株，主要表現(xiàn)為對外來DNA缺乏免疫力。大腸桿菌DH5α是基因工程中常用的宿主菌之一。與正常菌株相比，它缺乏某種免疫機(jī)制。