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如何選擇DNA提取方法

閱讀：976 發(fā)布時(shí)間：2023-10-25
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　　DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢？讓我們一起來看看吧！

　　一、酚氯仿抽提法

　　酚氯仿抽提是去除蛋白質(zhì)的有效手段，但如果蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度，裂解體系中的蛋白質(zhì)就不會(huì)被一次性去除，需要進(jìn)行多次反復(fù)抽提，而每次的抽提均會(huì)導(dǎo)致核酸的損失。酚氯仿抽提的優(yōu)勢是成本低廉，對實(shí)驗(yàn)條件要求較低。二、高鹽沉淀法

　　高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一個(gè)變種，其省略了酚氯仿抽提操作的麻煩，并且克服了酚氯仿抽提方法的缺點(diǎn)，只是得到DNA的純度不夠穩(wěn)定。

　　三、柱式法

　　過柱法利用某些固相介質(zhì)，在某些特定的條件下，選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)及鹽的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離，是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。

　　離心柱法DNA提取它的優(yōu)點(diǎn)是比傳統(tǒng)的酚氯法提取的純度高，有利于RNA保護(hù)，而且能進(jìn)行微量操作，以其低廉的價(jià)格和相對便捷的操作，漸逐取代了傳統(tǒng)DNA提取方法，被高?？蒲兴仁袌銎毡榻邮?。

　　四、磁珠法

　　該方法將純化介質(zhì)包被在納米級的磁珠表面，通過介質(zhì)對DNA的吸附，在外加磁場的作用下使DNA附著于磁珠并定向移動(dòng)，從而達(dá)到核酸與其它物質(zhì)分離的目的。磁珠法的優(yōu)勢是高質(zhì)量、高通量滿足如今對核酸提取效率的需求；靈敏度高(只需微量的樣本)；分離速度快(磁場分離只需幾秒鐘)；

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