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陽(yáng)離子交換色譜柱的維護(hù)和清洗方法
陽(yáng)離子色譜柱的操作壓力,氣動(dòng)和儲(chǔ)放基本與陰離子色譜柱相似,一般陽(yáng)離子色譜貯備液均采用淋洗液,但對(duì)于羧酸型陽(yáng)離子色譜柱,為了避免色譜固定相產(chǎn)生酯,不能采用醇類(lèi)作為流動(dòng)相成分,一般也不用堿作為流動(dòng)相成分,特別是硅膠型基質(zhì)的固定相。
對(duì)于離子色譜柱的清洗,主要可分為以下兩種情況:
(一)高價(jià)陽(yáng)離子和酸溶性組分的清洗
1 配合1mol/l HCL清洗液;
2 斷開(kāi)抑制器,如果系統(tǒng)含有保護(hù)住和分離柱,將保護(hù)柱接在分離柱之后;
3 設(shè)置泵的流速對(duì)4mm色譜柱為1.0ml/min;對(duì)2mm色譜柱為0.5ml/min;
4 用10mmol/l HCl沖洗色譜柱15min;
5 用清洗液通色譜柱60min;
6 用10mmol/l HCl沖洗色譜柱;
7 用淋洗液平衡色譜柱30min;
8 重新連接抑制器到色譜柱和保護(hù)柱。
(二)親脂性陽(yáng)離子和有機(jī)污染
1 斷開(kāi)抑制器,將色譜柱直接與泵相連;
2 設(shè)置泵的流速對(duì)4mm色譜柱為1.0ml/min;對(duì)2mm色譜柱為0.5ml/min;
3 如果對(duì)梯度泵分別設(shè)置100mmol/l HCl和90%乙腈,用梯度洗脫色譜柱,如果沒(méi)有梯度泵則分別用這兩種清洗液清洗色譜柱;
4 重新連接色譜柱,用淋洗液重新設(shè)置平衡色譜柱。