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各類（液相色譜法）ＨＰＬＣ的特點及應用
閱讀：1480 發(fā)布時間：2015-11-20
色譜法（ＨＰＬＣ），zui早是俄國植物學家Ｍ．Ｔｓｗｅｔｔ于１９０６年提出。經典液相色譜法是在常溫常壓下進行，運行速度慢，柱效低，不能在線檢測。ＨＰＬＣ克服了經典液相色譜這一系列缺點，且具有以下優(yōu)點：分離效率高、分析速度快、靈敏度高、色譜柱可反復使用、流動相可選擇范圍廣、流出組分易分離、均采用計算機控制色譜條件和色譜的處理程序均在線檢測等。
１ 按照功能（用途）分類 ：
（１）分析型。分析型ＨＰＬＣ主要用于樣品的檢測以及定性、定量分析。在使用時樣品和洗脫液通常廢棄，其目的主要是全面獲得樣品的組成信息。
（２）制備型。制備型ＨＰＬＣ是基于液相色譜法的各大優(yōu)點用于樣品的分離、富集或純化。目前，其在中藥研究領域中的應用主要有標準品的制備和樣品的純化分離等。
２ 按照分離原理分類 ：
分配色譜（按照固定相和流動相的極性可分為正相分配色譜和反向分配色譜）、吸附色譜、離子交換色譜、離子對色譜、尺寸排阻色譜和膠束色譜等。其中常用的有分配色譜和離子對色譜。 （１）分配色譜。分配色譜中的反向分配色譜是目前在液相色譜法中使用，它占整個ＨＰＬＣ應用的８０％左右。一般用非極性固定相（如Ｃ１８、Ｃ８）；流動相為水或緩沖液，常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水相溶的有機溶劑調節(jié)保留時間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。
(２）離子對色譜法。常用ＯＤＳ柱，流動相為甲醇-水或乙腈-水，水中加入離子對試劑，在一定的ｐＨ值范圍內進行分離。被測組分時間與離子對性質、濃度、流動相組成及其ｐＨ值、離子強度有關。主要用于離子型化合物的分離分析。