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脂溶性維生素樣品檢測方法對比
針對液相色譜儀的眾多優(yōu)點(diǎn),大多數(shù)文獻(xiàn)中都采用反相色譜法。它包括短鏈烷基(如C8)反相系統(tǒng)和長鏈烷基(如C18)反相系統(tǒng)。其中C18柱應(yīng)用較為廣泛,綜合短鏈烷基鍵合和長鏈烷基鍵合的眾多特征可得出使用C18柱對脂溶性維生素分離是一種較好的方法。脂溶性維生素常用的檢測方法有液相色譜與紫外檢測器(包括二級管陣列檢測器DAD)、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器。
液相色譜-紫外檢測器聯(lián)用(LC-UV) UV是液相色譜中應(yīng)用zui廣泛的一種檢測器,其靈敏度較高、噪音低、線形范圍寬,對流速和溫度的波動(dòng)不靈敏,適用于制備色譜。由于可變波長紫外檢測器可選擇的波長范圍很大,即能提高檢測器的選擇性,又可選用組分的zui靈敏吸收波長進(jìn)行測定,從而提高了檢測的靈敏度。因此,用LC-UV測定脂溶性維生素,可以隨意選擇吸收波長的范圍,提高了工作人員的工作效率。
液相色譜-熒光檢測器聯(lián)用(LC=FD) FD是一種具有高靈敏度和高選擇性的檢測器,FD的靈敏度比紫外吸收檢測器高100倍,對痕量組分檢測時(shí),是一種的檢測工具。但其線性范圍較窄,測定中不可使用能熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑做流動(dòng)相,對不能直接產(chǎn)生熒光的物質(zhì),要使用色譜柱后衍生技術(shù),操作比較復(fù)雜。所以,在測定脂溶性維生素時(shí),UV比FD測定更快速。
液相色譜-電化學(xué)檢測器聯(lián)用(LC-ECD) EDC的靈敏度很高,應(yīng)用范圍廣,尤其適合于痕量組分的分析。凡具有氧化還原活性的物質(zhì)都能進(jìn)行檢測,不具有氧化還原活性的化合物必須進(jìn)行衍生化后,方可進(jìn)行電化學(xué)檢測。一般在使用ECD注意流動(dòng)相必須能導(dǎo)電;流動(dòng)相必須連續(xù)不斷地除氣;選適當(dāng)?shù)耐饧与娢?/span>,提高檢測器的選擇性和穩(wěn)定性;流速和溫度需十分穩(wěn)定。雖然國內(nèi)、外有ECD測定脂溶性維生素的相關(guān)報(bào)道,但ECD干擾因素較多,操作起來比UV復(fù)雜,影響工作效率。
綜上所述,結(jié)合LC-UV的可行性,利用LC-UV檢測脂溶性維生素應(yīng)是。