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液相色譜儀分析前分離目的的確定

閱讀:899        發(fā)布時(shí)間:2015-9-8

  液相色譜儀分離的目的必須十分明確,下面的問題在建立方法之初就應(yīng)確定:

  (1)主要目的是什么?定量或定性,還是定性、定量同時(shí)做?; 

  (2)是否有必要解析出樣品的所有成分?譬如可能有必要分離出產(chǎn)品中的所有降解

物或雜質(zhì),以使含量測定結(jié)果更加可靠,但卻沒必要將它們彼此*分開。 

  (3)如要求定量分析,準(zhǔn)確度與精密度需多大?樣品主要成分的精密度通常能達(dá)到

±12%,特別是不需樣品預(yù)處理的情況。 

  (4)特殊化合物可能會以不同的樣品形式出現(xiàn)(如:原料藥,一種或多種形態(tài),環(huán)

保樣品等)。是否需要一種以上的HPLC方法?單一方法分離不同形態(tài)樣品是否理想?

  5)一次將分析多少樣品?當(dāng)必須同時(shí)處理大量樣品時(shí),運(yùn)行時(shí)間將變得非常重要。

有時(shí)甚至為了縮短運(yùn)行時(shí)間而以犧牲樣品分離度作代價(jià),如縮短柱長或加快流速。當(dāng)一次分析的樣品數(shù)目超過10個(gè),運(yùn)行時(shí)間一般應(yīng)控制在20min以內(nèi)。

   (6)將要使用該方法的實(shí)驗(yàn)室中,有哪些HPLC設(shè)備?色譜柱能否恒溫系統(tǒng)能否做梯度洗脫?該方法是否可在不同設(shè)計(jì)與生產(chǎn)的設(shè)備上運(yùn)行?     

   方法建立實(shí)驗(yàn)開始之前,應(yīng)明確對方法的這些要求。

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