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液相色譜儀樣品的預(yù)處理和檢測(cè)
液相色譜儀樣品的預(yù)處理和檢測(cè)
1. 預(yù)處理：樣品來源形式不同，可能以如下形式出現(xiàn)：
a 可直接進(jìn)樣的溶液；
b需稀釋、pH緩沖、加人內(nèi)標(biāo)或其它定容操作的溶液；
c必須首先溶解或提取處理的固體；。
d樣品需預(yù)處理以除去干擾物和或保護(hù)色譜柱或儀器不受損害。
可直接進(jìn)樣的樣品有操作方便、精密度好的優(yōu)點(diǎn)，然而大多數(shù)液相色譜儀分析的樣品需稱重或稀釋定容后才能進(jìn)樣。當(dāng)樣品溶劑成分接近于流動(dòng)相時(shí)，一般不會(huì)產(chǎn)生基線波動(dòng)等問題，通常能夠得到較好的結(jié)果。有些樣品在注入HPLC前需進(jìn)行部分分離（預(yù)處理），以除去干擾物、濃縮樣品或消除“柱殺手"，因此了解樣品和各種被測(cè)物的濃度范圍非常重要。
2. 檢測(cè)：HPLC方法建立期間，在*次進(jìn)樣前，我們必須有把握所選擇的檢測(cè)器能檢測(cè)到所有的被測(cè)樣品組分。通常可變波長紫外(UV)檢測(cè)器，因這種檢測(cè)器使用方便，且可用于大多數(shù)樣品。UV光譜數(shù)據(jù)可從文獻(xiàn)中查找，也可通過所測(cè)樣品成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)估算，直接測(cè)得（如果可拿到化合物純品）或在HPLC分離期間用二極管陣列檢測(cè)器（PDA）得到。樣品對(duì)UV檢測(cè)響應(yīng)不足時(shí)，可考慮使用其它類型檢測(cè)器(熒光，電化學(xué)等)，或衍生化樣品使檢測(cè)信號(hào)增強(qiáng)。