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分子尺寸排阻液相色譜法檢測戊型肝炎類病毒顆粒
閱讀：1060 發(fā)布時(shí)間：2017-10-23
分子尺寸排阻液相色譜法檢測戊型肝炎類病毒顆粒
戊型肝炎是由悟性肝炎病毒引起的急性病毒性肝炎，主要通過糞—口途徑經(jīng)腸道傳播。我國是戊型肝炎的流行區(qū)，有效的疫苗對(duì)控制戊型肝炎的流行十分必要。由于HEV不能在體外培養(yǎng)，相關(guān)疫苗的研究主要集中在不經(jīng)同的表達(dá)系統(tǒng)制備種族保護(hù)性抗原。HEV ORF2編碼抗原在戊型肝炎的保護(hù)性免疫中起重要作用，并可在昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中自主包裝成戊型肝炎類病毒顆粒，可用于戊型肝炎疫苗的開發(fā)。
本實(shí)驗(yàn)親戚構(gòu)建的HEV ORF2重組桿狀病毒在昆蟲細(xì)胞中可自主包裝成HE VLP,并存在HE VLP及ORF2蛋白單體兩種不同構(gòu)象。由于二者蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)相同，在區(qū)別分析 VLP和pORF2的同時(shí)，需要使用一種條件溫和、不破壞蛋白結(jié)構(gòu)分析方法。本實(shí)驗(yàn)采用分子尺寸液相色譜分析不同方法制備的重組ORF2抗原，旨在建立不同構(gòu)象 HEV ORF2抗原定性及定量分析的方法。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等，實(shí)行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
測定結(jié)果：
