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皖儀科技液相色譜對銀黃顆粒中綠原酸的含量測定

銀黃顆粒，中成藥名。為清熱劑，具有清熱解毒，消炎之功效。主治上呼吸道感染，如急性扁桃體炎、咽炎。方中銀花、連翹芳香辟穢，疏風(fēng)透表，清熱解毒；黃芩清瀉肺熱；丁香葉祛風(fēng)除濕止頭痛。諸藥共奏疏風(fēng)散熱，清瀉肺火之功。綠原酸是一種有機(jī)化合物，化學(xué)式為C16H18O9，是金銀花的主要抗菌、抗病毒有效藥理成分之一，半水合物為針狀結(jié)晶（水）,110℃變?yōu)闊o水化合物，25℃水中溶解度為4%，熱水中溶解度更大。易溶于乙醇及丙酮，極微溶于醋酸乙酯。

綠原酸具有較廣泛的抗菌作用，但在體內(nèi)能被蛋白質(zhì)滅活。與咖啡酸相似，口服或腹腔注射時(shí)，可提高大鼠的中樞興奮性?？稍黾哟笫蠹靶∈蟮男∧c蠕動和大鼠子宮的張力。有利膽作用，能增進(jìn)大鼠的膽汁分泌。對人有致敏作用，吸入含有本品的植物塵埃后，可發(fā)生氣喘、皮炎等。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 儀器配置

1.2 測試條件

色譜柱：C18 5μm, 4.6×250mm；

柱溫：35℃；

檢測波長：327nm

流速：1.0 ml/min；

流動相：A:乙腈；B:0.4%磷酸水進(jìn)樣量：20μL

1.3 儀器及試劑、耗材

試劑：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：綠原酸；

甲醇：色譜純；

磷酸：分析純；

輔助裝置：分析天平；

溶劑抽濾裝置；

超聲波清洗機(jī)；

實(shí)驗(yàn)材料：

濾膜：有機(jī)相濾膜，水相濾膜0.45μm

1.4 標(biāo)樣制備

綠原酸：使用50%甲醇將綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品(100 μg/mL in Methanol)稀釋10倍，制成10μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.5 樣品配制

銀黃顆粒：稱取銀黃顆粒0.5007g置50mL棕色容量瓶中，加50%甲醇40mL，超聲處理30min，放冷，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2 結(jié)果與討論

2.1標(biāo)準(zhǔn)品

                      圖1 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品(10μg/L)色譜圖

說明：由圖及數(shù)據(jù)可見，峰型對稱，理論塔板數(shù)為52573，滿足藥典要求：理論塔板數(shù)按綠原酸計(jì)不低于2000。

2.2 樣品

       圖2 銀黃顆粒特征譜圖(mAU-100—1600)

        圖3 銀黃顆粒特征譜圖(mAU-20—200)

說明：由上述銀黃顆粒特征譜圖可見，樣品分離較好，樣品分離度在1.5以上。2.3 樣品重復(fù)性

          圖4銀黃顆粒色譜疊加圖(n=3)

說明：由上述銀黃顆粒重復(fù)性數(shù)據(jù)可見，樣品重復(fù)性較好，保留時(shí)間RSD值為0.073%，峰面積RSD值為0.187%。

3 結(jié)論

本次采用皖儀科技高效液相色譜儀配置紫外-可見光檢測器，依據(jù)《中國藥典》2020版對銀黃顆粒中的綠原酸進(jìn)行含量測定，由上述數(shù)據(jù)可知，綠原酸理論塔板數(shù)為53573，符合藥典要求理論塔板數(shù)按綠原酸計(jì)不低于2000；重復(fù)性較好，保留時(shí)間RSD值為0.073%，峰面積RSD值為0.187%；本次檢測某品牌銀黃顆粒中含綠原酸19.363μg/mL。