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使用紫外可見分光光度計(jì)需要注意哪些細(xì)節(jié)

閱讀:1264      發(fā)布時(shí)間:2023-5-11
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  紫外可見分光光度計(jì)是一種常用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)儀器,它可以測(cè)量樣品在不同波長下的吸收率。為了確保正確、精確地進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以下是使用紫外可見分光光度計(jì)時(shí)需要注意的事項(xiàng)。
  1.樣品制備:在進(jìn)行測(cè)量前,必須對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)闹苽洹@?,在分析有機(jī)化合物時(shí),應(yīng)避免使用含有雜質(zhì)的溶劑;在測(cè)定蛋白質(zhì)的含量時(shí),應(yīng)確保裂解并去除可能影響測(cè)定結(jié)果的其他成分。
  2.光程長度:在進(jìn)行光譜測(cè)量之前,必須校準(zhǔn)光程長度以確保獲得正確的吸光度值。光程長度越短,吸收越小,因此應(yīng)盡可能使用相同長度的樣品池進(jìn)行比較。另外,在選擇樣品池時(shí)應(yīng)注意其透過率和均勻性。
  3.波長范圍:不同的樣品吸收峰位于不同的波長處,因此在進(jìn)行測(cè)量時(shí)應(yīng)選取合適的波長范圍。同時(shí),應(yīng)注意所選波長的精確性和重復(fù)性。為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)定期校準(zhǔn)儀器并檢查波長精度。
  4.參比溶液的使用:參比溶液可以用于校準(zhǔn)儀器并確定基線。在進(jìn)行光譜測(cè)量之前,應(yīng)使用參考溶液校準(zhǔn)儀器,以確保獲得準(zhǔn)確的吸光度值。
  5.清潔和維護(hù):對(duì)儀器進(jìn)行適當(dāng)?shù)那鍧嵑途S護(hù)可以延長其壽命并確保測(cè)量的準(zhǔn)確性。例如,在每次使用后,應(yīng)及時(shí)清潔樣品池和主體部件,并注意避免刮傷或磨損儀器表面。
  6.實(shí)驗(yàn)條件:實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、溫度和濕度等因素都可能影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,在進(jìn)行測(cè)量時(shí)應(yīng)控制好這些因素,并盡可能在相同的溫度和濕度條件下進(jìn)行比較。

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