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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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三角細(xì)胞搖瓶的相關(guān)制備流程

時(shí)間：2023/7/26閱讀：1582
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三角細(xì)胞搖瓶是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，主要用于各種懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，小容量的瓶子也可以用于培養(yǎng)基的制備或儲(chǔ)存。在培養(yǎng)CHO細(xì)胞時(shí)，就會(huì)用到這種耗材。
搖瓶種子制備流程如下：
1、培養(yǎng)基配制
搖瓶種子以培養(yǎng)具有強(qiáng)生長(zhǎng)活性的營(yíng)養(yǎng)菌體為目的，因而在配制培養(yǎng)基時(shí)必須全面、均衡地滿(mǎn)足菌體生長(zhǎng)對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求，包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。搖瓶種子在培養(yǎng)過(guò)程中不便于調(diào)節(jié)PH，因此在選擇培養(yǎng)基時(shí)要考慮培養(yǎng)過(guò)程中PH的穩(wěn)定，可以通過(guò)生理酸、堿性物質(zhì)的平衡搭配及加入磷酸鹽、碳酸鈣之類(lèi)緩沖劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。
2、接種
搖瓶種子的接種一般采用斜面種子挖塊法或米孢子粒計(jì)數(shù)接入法。這種接種方式難于掌握一致的接種量，可能會(huì)影響種子質(zhì)量的穩(wěn)定。對(duì)接種量敏感的菌種，盡量采用懸液接種法，即用無(wú)菌蒸餾水將斜面種子或米孢子粒上的細(xì)胞或孢子洗下，制成細(xì)胞或孢子懸液，然后按一定體積或一定細(xì)胞數(shù)接種至搖瓶種子培養(yǎng)基中。
3、培養(yǎng)
在恒溫室內(nèi)的搖床上進(jìn)行培養(yǎng)，一般選用旋轉(zhuǎn)式搖床，這樣更利于培養(yǎng)時(shí)氣體交換。為了使細(xì)胞搖瓶中的水分蒸發(fā)量保持穩(wěn)定，恒溫室也應(yīng)控制好濕度。

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