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磁珠提取實時熒光定量PCR和普通PCR有什么區(qū)別？

閱讀：1471      發(fā)布時間：2022-5-13
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　　磁珠提取實時熒光定量PCR是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團，通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 
　　磁珠提取實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。
 
　　實時熒光定量PCR和普通PCR二者結(jié)果相同。都能說明生物體外的特殊DNA復(fù)制的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。但主要區(qū)別有以下：
 
　　1、二者應(yīng)用不同
 
　　熒光定量PCR主要是用來定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的，普通的PCR儀是做定性分析和擴增基因片段，定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作，反之不行。
 
　　2、二者系統(tǒng)組成不同
 
　　熒光定量PCR儀比普通的PCR儀多了熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)。
 
　　3、二者反應(yīng)要求不同
 
　　熒光定量PCR對擴增片段有較高的要求，一般為100－300bp，普通PCR可以擴增長點的片段。
 
　　4、二者原理不同
 
　　熒光定量PCR實時監(jiān)測與DNA結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光，普通OCR通過檢測插入DNA中核算染料的量來測定PCR產(chǎn)物量。

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