5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基是一種專門用于星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)的無菌、液體培養(yǎng)基，通常包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、生長因子、抗生素等成分。
5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基使用規(guī)范：
1.細(xì)胞接種
細(xì)胞密度：星形細(xì)胞接種密度根據(jù)細(xì)胞代次和狀態(tài)調(diào)整。
預(yù)處理：接種前用培養(yǎng)基預(yù)潤培養(yǎng)瓶/皿，避免細(xì)胞干燥損傷。
2.培養(yǎng)條件
溫度：37℃恒溫培養(yǎng)。
氣體環(huán)境：5%CO2（維持pH穩(wěn)定），部分星形細(xì)胞可能需要低氧條件。
換液頻率：每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基，避免代謝產(chǎn)物積累導(dǎo)致細(xì)胞毒性。
3.傳代與凍存
消化方法：用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化，血清終止消化。
凍存：使用含10%DMSO的凍存培養(yǎng)基，程序降溫后轉(zhuǎn)入-80℃或液氮保存。
5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基注意事項：
1.避免污染
操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘，佩戴手套和口罩。
開封的培養(yǎng)基需在1個月內(nèi)用完，避免反復(fù)凍融（可分裝為單次用量）。
2.血清質(zhì)量控制
胎牛血清需經(jīng)過檢測（如支原體、病毒、內(nèi)毒素），熱滅活可滅活補體成分。
不同批次血清可能影響細(xì)胞狀態(tài)，建議批量采購并測試。
3.生長因子保存
bFGF/EGF需分裝為小劑量，-20℃保存，避免反復(fù)凍融失效。
4.特殊需求調(diào)整
原代細(xì)胞培養(yǎng)：可能需要添加更高濃度血清或基質(zhì)包被。
分化誘導(dǎo)：去除生長因子并添加低血清可誘導(dǎo)星形細(xì)胞分化。
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