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miRNA實驗解決方案（操作手冊）---第三章：miRNA 逆轉(zhuǎn)錄及實時熒光定量 PCR2025/1/8
一、miRNA逆轉(zhuǎn)錄及實時熒光定量PCR的概念miRNA逆轉(zhuǎn)錄的概念成熟miRNA的長度只有21~23nt，對miRNA進(jìn)行qPCR定量時，無法直接對其進(jìn)行正、反向引物的設(shè)計（通常正向引物就足以覆蓋m...
miRNA實驗解決方案（操作手冊）---第二章：miRNA提取2025/1/7
一、miRNA提取的方法miRNA提取的難點在于其分子太小，不易被醇類沉淀，也不易被常規(guī)的硅膠吸附膜吸附。miRNA的提取方法主要有兩種形式，一種是提取樣品中的總RNA后，通過PAGE電泳或PEG，將...
miRNA實驗解決方案（操作手冊）---第一章：miRNA簡介2025/1/7
一、miRNA的合成途徑在動物細(xì)胞核中，miRNA基因的初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物Pri-miRNA（長度大約為300～1000nt）被RNaseIIl-Drosha酶切割成為發(fā)夾結(jié)構(gòu)前體miRNA（Pre-miR...
探索蛋白質(zhì)的新奧秘2024/12/25
親愛的各位科研小伙伴，是不是還為找不到特異的磷酸化抗體而發(fā)愁？今天將為你介紹一款令人振奮的科研利器--Phos-tag!這不僅是一種磷酸結(jié)合標(biāo)簽，更是一位幫你解鎖蛋白質(zhì)世界秘密的超級助手！GLPbio...
如何高效學(xué)習(xí)并掌握實驗操作？2024/6/26
學(xué)會一個實驗為什么很困難？旁觀揣摩、網(wǎng)絡(luò)搜索、屢做屢錯。是大部分同學(xué)學(xué)習(xí)實驗的真實寫照。為什么會這樣？因為，大部分實驗室沒有專門的課程或資料來幫助新生學(xué)習(xí)實驗知識。所以，大家只能靠看、靠搜、靠猜。這種...
每天感到疲倦、情緒低落？可能是這個功能在減退2024/6/24
【好困，好累，好煩】，如果每天都感覺疲憊、精神不濟、心情不佳，那么這種情況可能是甲狀腺功能在減退！甲狀腺分泌的甲狀腺激素可通過血液運輸?shù)饺?，廣泛調(diào)節(jié)新陳代謝，堪稱人體的「發(fā)動機」。而甲狀腺功能減退癥...
質(zhì)粒圖譜2024/6/24
質(zhì)粒圖譜為質(zhì)粒DNA序列的物理圖譜，提供了包括質(zhì)粒的大小、篩選標(biāo)記、克隆位點、轉(zhuǎn)錄及翻譯元件等信息，為我們選擇質(zhì)粒、了解質(zhì)粒特點及應(yīng)用提供了重要依據(jù)。對于初學(xué)者來說該如何去閱讀質(zhì)粒圖譜呢？今天來給大家...
Tamoxifen誘導(dǎo)Cre-ERT2小鼠 使用指南2024/6/20
Cre-ERT2小鼠是一類含有雌激素受體的配體結(jié)合區(qū)突變體（ERT）與cre重組酶的融合蛋白表達(dá)的小鼠。Cre-ERT2在無Tamoxifen誘導(dǎo)的情況下，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)處于無活性狀態(tài)；當(dāng)Tamoxife...
熱激轉(zhuǎn)化大腸桿菌的原理2024/6/20
鈣離子使得DNA沉淀于細(xì)胞表面，在熱激使得細(xì)胞膜出現(xiàn)間隙后，進(jìn)入胞內(nèi)，實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的目的。這個過程主要分2步：1.低溫、低滲的鈣離子溶液，能使得大腸桿菌細(xì)胞膨脹；鈣離子使得細(xì)胞膜通透性改變，容易粘附外源D...
WB實驗詳細(xì)步驟及用到的相關(guān)試劑匯總2024/6/17
以下是WB實驗的詳細(xì)步驟及相關(guān)試劑耗材匯總：一、實驗步驟1.蛋白提?。菏褂眠m當(dāng)?shù)牧呀庖禾崛〉鞍住?.蛋白定量：采用Bradford法或BCA法等測定蛋白濃度。3.SDS-PAGE電泳：配制分離膠和濃縮...
假陽性？條帶不對？菌液PCR問題一網(wǎng)打盡2024/6/13
1.平板長菌，但挑的單克隆菌落搖不起來？產(chǎn)生原因及解決辦法：（1）挑取的單克隆為雜菌，呈假陽性。出現(xiàn)這種情況的原因包括：①配制平板過程中，加入抗生素時溫度過高致使抗生素滅活；②配制平板過程中，抗生素濃...
睡眠：一個被忽視的公共衛(wèi)生問題2024/6/12
《柳葉刀-糖尿病與內(nèi)分泌學(xué)》（TheLancetDiabetes&Endocrinology）發(fā)表社論指出，對于18歲及以上的成年人，每天建議的睡眠時間為7-9小時，但實時經(jīng)濟、現(xiàn)代生活方式、工作壓力...
細(xì)胞培養(yǎng)實驗步驟詳解2024/6/12
以下是細(xì)胞培養(yǎng)實驗常見的步驟及用到的產(chǎn)品：步驟：1.準(zhǔn)備工作：超凈工作臺消毒；-用到的產(chǎn)品：75%酒精等；2.培養(yǎng)基配制：將基礎(chǔ)培養(yǎng)基與血清等添加物混合；-用到的產(chǎn)品：基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI...
提高效率與質(zhì)量的實用技巧2024/6/12
1、提高實驗的效率1）實驗前有計劃安排、預(yù)備方案或者“車輪戰(zhàn)”（細(xì)胞實驗）一般從基礎(chǔ)的培養(yǎng)細(xì)胞開始，開始實驗時，實驗方法一般來自于實驗室或者文獻(xiàn)中條件優(yōu)化以及自我推測及驗證，因此做實驗之前預(yù)想實驗方案...
細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的操作步驟及經(jīng)驗分享2024/6/12
細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是一種常用的基因傳遞技術(shù)，其中慢病毒轉(zhuǎn)染作為一種有效的手段被廣泛采用。通過慢病毒載體，可將目的基因序列穩(wěn)定地整合到宿主細(xì)胞基因中，實現(xiàn)長期穩(wěn)定的表達(dá)。這種轉(zhuǎn)染方法不僅能夠在多種細(xì)胞系中高效...
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