1.相信很多小伙伴將質(zhì)粒電泳后發(fā)現(xiàn)，質(zhì)粒不是單一條帶，而是出現(xiàn)了很多條帶，例如下圖：

2.質(zhì)粒為什么出現(xiàn)這樣的情況？

一般理解來說，質(zhì)粒DNA應(yīng)如圖2（左）所示的簡單環(huán)狀結(jié)構(gòu)。然而，雙鏈環(huán)狀DNA的分子軸變形或雙螺旋的扭曲，導(dǎo)致閉合環(huán)狀DNA中每個螺旋轉(zhuǎn)彎的實際堿基對數(shù)量發(fā)生變化，或者導(dǎo)致螺旋軸發(fā)生規(guī)則的空間變形，產(chǎn)生拓撲結(jié)構(gòu)，形成質(zhì)粒DNA的超螺旋性狀（圖2右）。

因此，不同的拓撲結(jié)構(gòu)將使質(zhì)粒DNA形成多種形式，包括共價封閉圓形（CCC）形式、開放圓形（OC）形式（也稱為“缺口形式"）和線性形式（通常通過奇特的限制性消化獲得）。在CCC形式中，兩條DNA鏈?zhǔn)枪矁r閉合的，DNA是超螺旋的。這種亞型的結(jié)構(gòu)最緊密。如果DNA斷裂產(chǎn)生缺口，就會產(chǎn)生OC，卷曲也就消失了。當(dāng)兩條線在同一位置斷裂時，就會產(chǎn)生線性形式。此外，質(zhì)?？赡芤怨丫垠w形式出現(xiàn)，例如串聯(lián)體，而串聯(lián)體又可能以不同的異構(gòu)體形式存在。所有這些形式都可以通過瓊脂糖凝膠電泳觀察到。但出現(xiàn)多少種條帶會根據(jù)你的質(zhì)粒提取技術(shù)、質(zhì)粒的新鮮程度、電泳液的配置以及瓊脂糖凝膠的配置等有所不同。

2.怎么區(qū)分質(zhì)粒的電泳條帶？

一般來說，質(zhì)粒遷移速度由快到慢分別是共價封閉原形（超螺旋）形式、線性和開放圓環(huán)（開環(huán)）形式，并伴隨著其他形式。原因是：電泳DNA遷移速率與分子大小和構(gòu)象相關(guān)，分子構(gòu)象越大，空間位阻阻力越大。超螺旋結(jié)構(gòu)較為緊密，因此跑的快；開環(huán)質(zhì)粒由于DNA斷開，阻力增大，因此跑的最慢。

3.怎么驗證質(zhì)粒是否可用？

綜上所述，質(zhì)粒存在多少條帶與多種因素相關(guān)，沒有存在絕對的衡量標(biāo)準(zhǔn)。但如果用限制性內(nèi)切酶消化質(zhì)粒DNA，只會出現(xiàn)一條清晰的條帶。并且，由于酶切形成線性化DNA片段，其電泳遷移速率會比對照組原始質(zhì)粒的超螺旋結(jié)構(gòu)速度慢，可以檢驗質(zhì)粒是否被切開。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物致力成為推動生命科學(xué)進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東，服務(wù)面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。

可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。 專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術(shù)支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時為客戶提供服務(wù)。